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- Avaliação da bioatividade do corpo frutífero e esporos de Ganoderma lucidumPublication . Heleno, Sandrina A.; Tavares, Catarina; Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Vasconcelos, M. Helena; Martins, Anabela; Queiroz, Maria João R.P.; Ferreira, Isabel C.F.R.Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst. é uma das espécies de cogumelos mais estudadas do mundo devido às suas propriedades medicinais [1]. Este trabalho descreve a avaliação da capacidade antioxidante in vitro e antiproliferativa em células tumorais do extrato obtido a partir de diferentes partes do cogumelo. Os exemplares de Ganoderma lucidum foram colhidos em Bragança e divididos em duas amostras: corpo frutífero e esporos. A atividade antioxidante dos extratos metanólicos, obtidos a partir das duas amostras, foi avaliada através da captação de radicais livres, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica pela descoloração do β-caroteno e em homogeneizados de células cerebrais animais. A atividade antiproliferativa dos mesmos extratos foi avaliada em quatro linhas celulares tumorais humanas (pulmão- NCI-H460, mama- MCF-7, cólon- HCT-15 e estômago- AGS) pelo método da sulforrodamina B. O extrato obtido a partir do corpo frutífero revelou maior atividade antioxidante (EC50 entre 0,10 e 0,62 mg/mL) do que o extrato de esporos (EC50 entre 0,58 e 1,61 mg/mL). O extrato obtido a partir do corpo frutífero revelou uma atividade antiproliferativa em linhas celulares tumorais moderada (GI50 entre 93,3 e 112,6 μg/mL), enquanto o extrato obtido a partir dos esporos mostrou uma baixa atividade nas linhas celulares NCI-H460 e HCT15 e nenhuma atividade nas restantes linhas na máxima concentração testada (400 μg/mL). Os extratos foram caracterizados por HPLC-DAD-MS [2]. O corpo frutífero apresentou maior quantidade de ácidos fenólicos (1,23 mg/100 g massa seca) do que os esporos (0,61 mg/100g massa seca). Os ácidos p-hidroxibenzóico (0,58 mg/100 g) e p-cumárico (0.38 mg/100 g) foram os principais ácidos fenólicos identificados no corpo frutífero, bem como o ácido cinâmico (0,28 mg/100 g). Os esporos não apresentaram ácido p-hidroxibenzóico. Apesar dos compostos fenólicos estarem associados a vários efeitos benéficos para a saúde humana, pouco se sabe sobre as formas bioativas in vivo, atendendo às concentrações disponíveis na corrente sanguínea após ingestão, assim como à possibilidade de conjugação e metabolismo. Estão a sintetizar-se possíveis metabolitos dos compostos identificados nos extratos para avaliar a sua potencial bioatividade.
- Avaliação da bioatividade do corpo frutífero e esporos de Ganoderma lucidumPublication . Heleno, Sandrina A.; Tavares, Catarina; Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Vasconcelos, M. Helena; Martins, Anabela; Queiroz, Maria João R.P.; Ferreira, Isabel C.F.R.Ganoderma lucidum é uma das espécies de cogumelos mais estudadas do mundo devido às suas propriedades medicinais. Este trabalho descreve a avaliação da capacidade antioxidante in vitro e antiproliferativa em células tumorais do extrato obtido a partir de diferentes partes do cogumelo. A atividade antioxidante dos extratos metanólicos, obtidos a partir das duas amostras, foi avaliada através da captação de radicais livres, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica pela descoloração do β-caroteno e em homogeneizados de células cerebrais animais. A atividade antiproliferativa dos mesmos extratos foi avaliada em quatro linhas celulares tumorais humanas (pulmão- NCI-H460, mama- MCF-7, cólon- HCT-15 e estômago- AGS) pelo método da sulforrodamina B. Os extratos foram caracterizados por HPLC-DAD-MS.
- Bioactivity and chemical characterization of Fistulina hepatica extracts.Publication . Vaz, Josiana A.; Tavares, Catarina; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.Fistulina hepatica, the beefsteak fungus, belongs to the order Agaricales and is commonly found all over Europe, North America, Australia and North Africa. Being a good edible species, it has also been investigated for its medicinal and pharmaceutical capacities. The anti-tumor activity of F. hepatica polysaccharides extracts from the mycelial culture was reported after intraperitoneally administration into white mice [1]. Nevertheless, nothing has been reported in phenolic and polysaccharidic extracts from the fruiting body.
- Caracterização fenólica e avaliação da atividade antiproliferativa de Fistulina hepatica e Suillus collinitus em linhas celulares tumorais humanasPublication . Vaz, Josiana A.; Tavares, Catarina; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.Os cogumelos são uma importante fonte de compostos bioativos, com potencial antitumoral e propriedades imunoestimuladoras [1]. Por outro lado, podem ter potencial como alimentos funcionais e fonte de nutracêuticos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade inibitória do crescimento de linhas celulares tumorais humanas dos extratos metanólicos de duas espécies de cogumelos silvestres comestíveis do Nordeste Português: Fistulina hepatica e Suillus collinitus. Utilizou-se o ensaio da Sulforrodamina B em quatro linhas de células tumorais (pulmão- NCI-H460, mama- MCF-7, cólon- HCT-15 e estômago- AGS). Ao contrário do extrato de Fistulina hepatica que não revelou nenhuma atividade à máxima concentração testada (400μg/mL), o extrato de Suillus collinitus foi bastante potente, particularmente em células MCF-7 (GI50 25,2 ± 0,2 μg/mL). Numa concentração correspondente ao valor de GI50, o extrato induziu um sequestro dessas células na fase G1 do ciclo celular (avaliado por citometria de fluxo), com uma concomitante diminuição da percentagem de células na fase S. Causou ainda um aumento da percentagem de células apoptóticas de 6,0±0,2% para 15,3±2,0% e um forte aumento dos níveis de p53, p21 e PARP clivada, associado a uma diminuição da Bcl-2 e XIAP (a expressão das proteínas foi analisada por Western blot). No entanto, foi a Fistulina hepatica que apresentou a maior concentração de ácidos fenólicos (111,72 mg/Kg massa seca) no extrato metanólico, analisados por HPLC-DAD [2], devido à significativa contribuição dos ácidos protocatéquico (67,62 mg/Kg) e p-hidroxibenzóico (41,92 mg/kg). Os resultados obtidos indicam que a espécie Suillus collinitus pode ser uma fonte promissora de compostos bioativos, para além dos ácidos fenólicos. Em particular, o seu extrato metanólico parece ter um efeito no ciclo celular da linha tumoral de mama mediado pela p53, para além de induzir apoptose dessas células.
- Caracterização fenólica e avaliação da atividade antiproliferativa de Fistulina hepatica e Suillus collinitus em linhas celulares tumorais humanasPublication . Vaz, Josiana A.; Tavares, Catarina; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.Neste trabalho, avaliou-se a atividade antiproliferativa de extratos metanólicos, etanólicos e em água fervente de Fistulina hepatica e Suillus collinitus, dois cogumelos comestíveis do Nordeste de Portugal, em linhas celulares tumorais humanas. Determinaram-se ainda, cromatograficamente, os ácidos fenólicos presentes nos extratos metanólicos. Ao contrário dos extratos de Fistulina hepatica que não revelaram nenhuma atividade à máxima concentração testada (400 μg/mL), o extrato metanólico de Suillus collinitus foi bastante potente, particularmente em células MCF-7 (GI50 25,2±0,2 µg/mL), induzindo alterações no seu ciclo celular, aparentemente por um efeito mediado pela p53, e aumentando a percentagem de células apoptóticas.
- Ganoderma lucidum methanolic extract: chemical characterization in phenolic compounds and study of growth inhibitory activity in human tumour cell linesPublication . Heleno, Sandrina A.; Tavares, Catarina; Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Queiroz, Maria João R.P.; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.Ganoderma lucidum is one of the most extensively studied mushroom species due to its medicinal properties. It has been used as functional food and as chemopreventer in some countries for thousands of years, and became a popular dietary supplement ingredient in Western countries [1]. Some of its pharmacological properties have been related to antitumour properties, attributed to a wide variety of bioactive components such as polysaccharides, triterpenes, sterols, lectins and some proteins [2,3]. Nevertheless, the bioactive properties of its phenolic compounds have not been studied. The aim of this work was to study the potential antitumor activity of the methanolic extract of this mushroom. This extract of Ganoderma lucidum, collected in Northeast Portugal, was characterized in phenolic compounds, by high performance liquid chromatography coupled to photodiode array detection and mass spectrometry (HPLC-DAD-MS). The extract was further submitted to evaluation of growth inhibitory activity in four human tumour cell lines (MCF-7, NCI-H460, HCT15 and AGS), by the sulforhodamine B assay. The extract presented a moderate growth inhibitory activity in all the cell lines tested (values of GI50 between 93.3±18.1 and 112.6±11.7μg/mL).The following compounds were identified in the extract: p-hydroxybenzoic acid (0.58 ± 0.04 mg/100 g dw), p-coumaric acid (0.38 ± 0.03 mg/100 g dw) and cinnamic acid (0.28 ± 0.03 mg/100 g dw). Future work will elucidate the mechanism of action of the studied extract leading to the observed cell growth inhibition.
- A methanolic extract of Ganoderma lucidum fruiting body inhibits the growth of a gastric cancer cell line and affects cellular autophagy and cell cyclePublication . Oliveira, Beatriz; Reis, Filipa S.; Sousa, Diana; Tavares, Catarina; Lima, Raquel T.; Ferreira, Isabel C.F.R.; Santos, Tiago; Vasconcelos, M. HelenaGanoderma lucidum is one of the most extensively studied mushrooms as a functional food and as a chemopreventive agent due to its recognized medicinal properties. Some G. lucidum extracts have shown promising antitumor potential. In this study, the bioactive properties of various extracts of G. lucidum, from both the fruiting body and the spores, were investigated. The most potent extract identified was the methanolic fruiting body extract, which inhibited the growth of a gastric cancer cell line (AGS) by interfering with cellular autophagy and cell cycle.
- Mushroom extract increases p53 expression and causes cell cycle arrest and apoptosis in a breast cancer cell linePublication . Vaz, Josiana A.; Tavares, Catarina; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Ferreira, Isabel C.F.R.; Vasconcelos, M. HelenaMushrooms are part of the sexual life cycle of particular fungi with specific metabolic pathways, and therefore may contain a largely unexploited source of powerful new pharmaceutical products with potential antitumor properties [1,2]. Furthermore, they may have potential as functional foods. Suillus collinitus is an edible mushroom found in European pine forests. The aim of this work was to study the cytotoxic potential of extracts from this mushroom in various cancer cell lines. Different extracts (methanolic, ethanolic and aqueous) were prepared and extractinduced cell growth inhibition was assessed with the sulforhodamine B assay in four human tumour cell lines (lung, breast, colon and gastric cancer). The methanolic extract was further characterized in its phenolic composition by HPLC-DAD. The effects of the extract on cell cycle profile and apoptosis were evaluated by flow cytometry and the effect on the expression levels of proteins related to cell cycle and apoptosis was further investigated by Western blotting. Regarding cell growth inhibition, the methanolic extract was the most potent one, particularly in MCF-7 cells (GI50 25.2±0.2lg/ml). Moreover, the GI50 concentration ninduced a G1 cell cycle arrest, with a concomitant decrease in the percentage of cells in the S phase. Furthermore, it caused an increase in the percentage of apoptotic cells, from 6.0±0.2% in untreated cells, to 15.3±2.0% in treated cells. In addition, 48h treatment with the GI50 concentration caused a strong increase in the levels of p53, p21, cleaved caspase-3 and cleaved PARP, together with a decrease in Bcl-2. The main components identified in the methanolic extract were: protocatechuic acid (5.2±0.2mg/kg dw), p-hydroxybenzoic acid (14.1±1.2mg/kg) and cinnamic acid (1.3±0.2mg/kg). Results indicate that Suillus colinitus is a promising source of bioactive compounds. Particularly, its methanolic extract appears to have a p53-mediated effect on the normal cell cycle distribution and apoptosis induction in human breast tumor cells.
- Phenolic and polysaccharidic extracts of Suillus collinitus: chemical characterization, growth inhibitory activity and induction of cell cycle arrest in a breast cancer cell linePublication . Vaz, Josiana A.; Tavares, Catarina; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.The Northeast of Portugal is one of the European regions with higher mushrooms biodiversity. Mushrooms are a powerful source of new compounds, including low-molecular-weight (LMW, e.g. phenolic compounds) and high-molecular-weight (HMW, e.g polysaccharides) compounds, with potential antitumor and immunostimulating properties [1,2]. Furthermore, they may have potential as functional foods and sources of novel molecules. The aim of this work was to study the antitumor potential of the wild edible ectomycorrhizal mushroom, Suillus collinitus, collected from Northeast Portugal, and to characterize their LMW and HMW compounds.
- Phenolic extract from the fruiting body and spores of a medicinal mushroom - Ganoderma lucidum: investigating their antioxidant potential and antitumor cell growth inhibitory effectsPublication . Heleno, Sandrina A.; Tavares, Catarina; Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Queiroz, Maria João R.P.; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.Mushrooms are a source of bioactive compounds, some of them with antioxidant properties or with antitumour potential (1). Ganoderma lucidum is one of the most extensively studied mushrooms due to its medicinal properties, as functional food and as chemopreventive (2). Some of the pharmacological properties of its compounds (e.g. polysaccharides, glucoproteins, triterpenes and steroids) have been related to antitumor activity, including cell cycle arrest and induction of apoptosis (3). Nevertheless, the bioactive properties of its phenolic compounds remain unevaluated.