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Research Project
POTENCIAL NUTRACEUTICO DE COGUMELOS SILVESTRES DO NORDESTE DE PORTUGAL: ESTUDO DE PROPRIEDADES ANTIO-XIDANTES, ANTIPROLIFERATIVAS E INDUTORAS DA APOPTOSE
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Publications
Cogumelos silvestres portugueses: valorização como alimentos funcionais e fonte de nutracêuticos
Publication . Ferreira, Isabel C.F.R.; Vaz, Josiana A.; Barros, Lillian; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena
Os cogumelos silvestres possuem grande diversidade de biomoléculas com valor nutricional e/ou
propriedades medicinais. Neste trabalho, apresentam-se resultados do estudo de espécies do Nordeste de
Portugal. Os extratos fenólicos de Clitocybe alexandri, Lepista inversa e Suillus collinitus foram caracterizados
e mostraram potenciais efeitos anti-tumorais em linhas celulares tumorais humanas, que se traduzem
especificamente na indução de paragem do ciclo de divisão celular e na indução de morte celular programada
(apoptose) em linhas celulares modelo, derivadas de diferentes tipos de tumores humanos. Verificou-se que
extratos de C. alexandri induzem paragem no ciclo celular e apoptose numa linha celular de cancro do pulmão,
constituindo-se assim como fonte potencial de novos agentes citotóxicos. Descobriu-se ainda que o extrato
metanólico de S. collinitus aumenta a expressão da proteína supressora de tumores p53, causa paragem no ciclo
de divisão celular e aumenta a apoptose numa linha celular modelo de cancro da mama. Tendo em conta o
potencial anti-tumoral evidenciado em condições in vitro pelas espécies mencionadas, os extratos/compostos
fenólicos prefiguram-se como potenciais fontes de agentes citotóxicos e poderão encontrar, caso estudos
futuros o comprovem, potencial utilização no tratamento do cancro, a segunda causa de morte nos países
desenvolvidos. Em específico, podem potencialmente servir para acrescentar e diversificar os “pipelines” de
desenvolvimento de fármacos da indústria farmacêutica ou de alimentos funcionais.
Estudo de propriedades antioxidantes, antiproliferativas e indutoras de apoptose de cogumelos silvestres do nordeste de Portugal
Publication . Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.
Os cogumelos são um importante recurso
complementar de ecossistemas florestais e outros, com
propriedades nutricionais e medicinais milenarmente
reconhecidas. O objetivo deste trabalho foi a avaliação das
propriedades bioativas (antioxidantes e potencial inibidor de
crescimento de linhas celulares tumorais humanas) de
cogumelos silvestres comestíveis provenientes do Nordeste
de Portugal. Prepararam-se extratos metanólicos, etanólicos e
aquosos a partir de trinta e oito espécies diferentes. A
caracterização química foi efetuada por HPLC-DAD e
HPLC-Rl. Os ensaios de atividade antioxidante incluíram a
avaliação da atividade captadora de radicais DPPH, poder
redutor e inibição da descoloração do β-caroteno. A inibição do crescimento foi avaliado com o ensaio da Sulfarrodamina B em quatro linhas celulares tumorais
humanas (NCI-H460 - pulmão, MCF-7- mama, HCT-15 -
cólon e AGS - gástrico). Os efeitos no ciclo celular e
apoptose foram avaliados por citometria de fluxo; os níveis
de expressão de proteínas relacionadas com os processos
anteriores por Western blott. O extraio aquoso de Lepista
inversa apresentou a maior atividade antioxidante. O extrato
etanólico de Clitocybe alexandri induziu uma paragem do
ciclo celular em fase S e promoveu um aumento da
percentagem de células apoptóticas, em NCI-J-1460. O extrato
metanólico de Suillus collinitus induziu um ligeiro aumento
no número de células cm G I, com uma concomitante
diminuição na percentagem ele células na fase S do ciclo
celular e um aumento na percentagem de células apoptóticas
em MCF-7. Os ácidos protocatéquico, p-hidroxibenzoico, peumárico
e cinâmico foram os principais compostos
identificados nos extratos fenólicos (metanólico e etanólico ),
enquanto o manitol, a trealose e a arabinose foram os
principais açúcares encontrados no extrato polissacarídico
(aquoso), após hidrólise. Os ácidos fenólicos e o ácido
cinâmico apresentaram também atividade inibidora de
crescimento de linhas celulares tumorais, especialmente
quando combinados. O presente trabalho contribui para uma
melhor compreensão do potencial bioativo de cogumelos
silvestres comestíveis do Nordeste de Portugal.
Wild mushrooms Clitocybe alexandri and Lepista inversa: In vitro antioxidant activity and growth inhibition of human tumour cell lines
Publication . Vaz, Josiana A.; Heleno, Sandrina A.; Martins, Anabela; Almeida, Gabriela M.; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.
The in vitro antioxidant and growth inhibitory activity of extracts obtained from two Portuguese wild mushrooms (Clitocybe alexandri and Lepista inversa) was studied in human tumour cell lines. The extracts were phenolic (methanolic and ethanolic) and polysaccharidic (boiling water). The antioxidant activity assays included evaluation of radical-scavenging capacity, reducing power and inhibition of lipid peroxidation measured in liposome solutions. Extract-induced cell growth inhibition was measured in four different tumour cell lines (lung, breast, colon and gastric cancer) using the SRB assay. The polysaccharidic extract oft. inversa was the most potent as antioxidant (EC50 < 1.8 +/- 0.1 mg/ml), while the phenolic ethanolic extract of C alexandri was the most potent as inhibitor of growth of the studied cancer cell lines (Gl(50) <26.0 +/- 1.3 mu g/ml). Together, these activities indicate that these mushrooms are promising sources of bioactive compounds. (C) 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.
In vitro growth inhibitory activity of the Portuguese wild mushroom Clitocybe alexandri in human tumour cell lines
Publication . Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.
Some mushrooms are a powerful source of bioactive compounds. lndeed, many pre-clinical
studies have been conducted in human tumour cell lines and in some cases a number of
compounds extracted from mushrooms have entered clinical trials [1]. Our previous results
showed that phenolic (methanolic and ethanolic) and polissacharidic extracts from Clitocybe
alexandri inhibited the growth of four human cell lines (lung, breast, colon and gastric cancer) [2].
The aim of the present work was to: i) further elucidate the mechanism of action of the ethanolic
extract that leads to the observed cell growth inhibition, by analysing the cell cycle profile of the
NCI-H460 cells treated with this extract and ii) identify and quantify the chemical compounds
present in the phenolic and polissacharidic extracts.
Antioxidant activity and growth inhibitory activity of Portuguese wild mushrooms
Publication . Vaz, Josiana A.; Heleno, Sandrina A.; Martins, Anabela; Almeida, Gabriela M.; Vasconcelos, M. Helena; Ferreira, Isabel C.F.R.
Some mushrooms are a powerful source of bioactive compounds including antioxidants, inhibitors of human tumour cell lines growth, inducers of apoptosis and ent1ancers of
immunity. Indeed, many pre-clinical studies have been conducted in human tumour cell lines and
in some cases a number of compounds extracted from mushrooms have followed to Pl1ases I , l l
and Ill of clinical trials. There is an enormous source of wild mushrooms in Portugal, particularly in
the North. However, to our knowledge, no studies have been conducted so far to verify their bioactivities.
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Fundação para a Ciência e a Tecnologia
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SFRH/BD/43653/2008