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- Análise preliminar de formulações Ayurvédicas como fonte potencial para cosméticosPublication . Zacharias, Alessandra; Martins, Valter; Paula, Vanessa B.; Morais, Jorge Sá; Sousa, Maria JoãoGhee (manteiga clarificada) é uma preparação Ayurvédica (medicina tradicional indiana) rica em PUFA’s, com potencial anti-inflamatório e antioxidante. Além do uso culinário, é usado em queimaduras, cicatrização e tratamento de doenças cutâneas. Rosmarinus officinalis L. e Rosa spp. apresentam atividades antibacteriana, anti-inflamatória, anti tumoral e antioxidante. Desde a antiguidade, estas plantas são utilizadas medicinalmente e na perfumaria. Com objetivo de avaliação para desenvolvimento de um cosmeceutico inspirado nesta etnofarmacologia, foram preparadas duas emulsões, utilizando, extrato aquoso e lipídico: 1- Alecrim (A); 2- Rosas (R). Foi avaliado o pH inicial A=7,71 e R=7,38 e após 7 dias A=7,75 e R=7,75. Para teste de estabilidade as amostras ficaram em fotoperíodo de luz day-light (16h/dia;8h/escuro), não apresentado alterações nas qualidades organoléticas da formulação mantendo a estabilidade. Na análise de cromatografia gasosa (GC) para deteção dos ácidos gordos verificou-se a presença de ácidos gordos saturados e insaturados nas duas amostras. Na amostra A os ácidos Palmítico, Mirístico e Esteárico foram os com maior expressão; na amostra R foram os ácidos Oléico, Palmítico e Linoleico. Foi testada resistência ás infeções microbiológicas da formulação com Staphylococos aureos, Echerichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans observando-se sensibilidade a estes agentes o que indica a necessidade de adicionar um conservante para tempos de prateleira longos. Como continuação da investigação pretende-se analisar a composição fitoquímica e bioatividades de extratos e óleos essenciais de novas plantas ayurvedicas, como a Centella asiatica L. para incorporação no cosmético a desenvolver.
- Diversity assessment in the Portuguese genebank collection of tomato (Solanum lycopersicum L.) accessions: Insights for breeding and sustainable conservationPublication . Pinela, José; Montoya, César; Martins, Valter; Nunes, M. Eugénia; Rocha, Filomena; Lopes, Violeta R.; Barata, Ana Maria; Carvalho, Ana Maria; Ferreira, Isabel C.F.R.; Barros, LillianTomato germplasm is source of variability used by plant breeders to develop improved cultivars and part of the natural heritage to be preserved. In this study, the diversity among twenty Portuguese tomato accessions was evaluated, considering morphological and agronomic descriptors, molecular data, and compositional aspects. The tomato accessions captured 77.5% of the total 19 alleles detected. Important information on the selection of SSR loci in diversity analysis for the tomato genotypes was provided. The studied genotypes were rich in car-bohydrates and source of ascorbic acid. Citric acid and palmitic, linoleic, oleic, stearic, and alpha-linolenic acids were the major organic and fatty acids, respectively. The four tocopherol isoforms were detected and alpha-tocopherol was the most abundant. When correlating molecular and compositional data, it seemed that the greater the het-erozygosity, the greater the compositional variance. However, despite the genetic distance that characterized these accessions, some were chemically similar. Overall, the genetic differentiation among genotypes provided useful information for parental selection in breeding and other genetic studies.
- Importância da caracterização de germoplasma de variedades tradicionais de tomate para consumo em frescoPublication . Martins, Valter; Pinela, José; Rocha, Filomena; Barros, Lillian; Barata, Ana Maria; Ferreira, Isabel C.F.R.; Carvalho, Ana MariaO Banco Português de Germoplasma Vegetal (BPGV), no âmbito da sua missão, recolhe e conserva germoplasma vegetal de espécies silvestres e cultivadas de todo o território nacional, nomeadamente germoplasma de recursos agrícolas, tais como variedades tradicionais de tomateiro. Selecionadas ao longo de gerações, as variedades tradicionais além da diversidade genética que contêm em si, correspondem a tipos de adaptabilidade às mais diversas condições (e.g. climáticas e edáficas, entre outras) e a preferências de agricultores e consumidores, no que se refere, por exemplo, a particularidades agronómicas, nutricionais, organolépticas e sensoriais. A gestão destes recursos conservados implica diferentes tarefas, entre as quais a caracterização dos acessos mantidos no BPGV, para avaliar a diversidade genética de cada um e descrever as suas principais características morfológicas, químicas e moleculares. Neste trabalho pretendeu-se realizar a avaliação de germoplasma de tomateiro da colecção do BPGV (variedades tradicionais de Solanum lycopersicum L.), no sentido de identificar e descrever a diversidade genética contida nos acessos conservados nesta instituição.
- Análise preliminar da manteiga clarificada como fonte de um potencial cosmecêuticoPublication . Zacharias, Alessandra; Martins, Valter; Paula, Vanessa B.; Morais, Jorge Sá; Sousa, Maria JoãoGhee (manteiga clarificada) é uma preparação Ayurvédica (medicina tradicional indiana) rica em ácidos gordos essenciais com propriedades anti-inflamatória e antioxidante. Além do uso culinário, é usado na cicatrização de feridas, queimaduras e tratamento de doenças cutâneas. Shatadhauta ghrita é uma emulsão obtida, tradicionalmente, por cem lavagens do ghee, aumentando sua absorção cutânea. Mantém a pele hidratada, proporcionando baixa carga bacteriana potenciando a regeneração celular e histológica. Rosmarinus officinalis L. (Alecrim) e Rosa spp (Rosa) apresentam atividades antibacteriana, anti-inflamatória, antitumoral e antioxidante. Desde a antiguidade, estas plantas são utilizadas medicinalmente e na perfumaria. Com objetivo de avaliação para desenvolvimento de um cosmecêutico inspirado nesta etnofarmacologia, foram preparados dois shatadhautas, utilizando maceração lipídica com Alecrim (A) e Rosas (R) e extrato aquoso dessas plantas para as lavagens. Foi avaliado o pH inicial A=7,71 e R=7,38 e após sete dias A=7,75 e R=7,75. Para teste de estabilidade as amostras ficaram em fotoperíodo de daylith (16/dia;8/escuro), não apresentado alterações nas qualidades organoléticas da formulação mantendo a estabilidade, no final do ensaio. Foi testada resistência ás infeções microbiológicas da formulação com Staphylococos aureos, Echerichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans observando-se sensibilidade a estes agentes o que implica a necessidade de adicionar um conservante para tempos de prateleira longos. A cromatografia gasosa (GC) para deteção dos ácidos gordos verificando-se a presença de ácidos gordos saturados e insaturados. Na amostra A ác. Palmítico e ác. Mirístico; na R ác. Oléico e ác. Palmítico foram os com maior expressão.
- Estudio de la hidrólisis de curcumina microencapsuladaPublication . Martins, Valter; Valero, MargaritaA Curcuma longa é uma planta da família das Zingiberáceas. A parte oficinal é a raiz triturada e seca, denominada “turméric”. O “turméric” contem 3-5% de pigmentos amarelos formados por uma mistura de curcuminoides os quais são análogos químicos do componente principal curcumina (1-7-bis(4-hidróxi-3-metoxifenil)-1,6-heptadieno-3,5-diona). A curcumina apresenta uma grande variedade de propriedades terapêuticas entre elas: ação anti-inflamatória, antioxidante, anti-tumoral, anti-microbiana, hepatoprotector, cardioprotector, hipoglucemiante, anti-artritico, prevenção por HIV y prevenção de Alzeimer. Apesar das suas grandes qualidades terapêuticas, a curcumina apresenta dois grandes inconvenientes, que comprometem a sua utilização terapêutica:(1) É uma molécula muito pouco solúvel em água (≈20μg/); (2) É muito instável por sofrer hidrólise em meio aquoso; Uma forma habitual de aumentar a solubilidade de substâncias pouco solúveis, assim como a estabilização de compostos instáveis, é a micro/nano-encapsulação em agregados micelares de diferentes estruturas tais como micelas, vesiculas e membranas. Por tudo isto, neste trabalho estuda se a hidrólise da curcumina em água e micro— encapsulada nos tensioativos: não iónico Plurónico F127 (F127); catiónico, Bromo de dioctadecildimetilamónio (DODAB); e mistura de ambos F127:DODAB. O DODAB em água forma vesiculas (bicamada fechada), estas podem ser unilamelares ou multilamelares dependendo da concentração e temperatura utilizada. A concentração e temperatura utilizadas correspondem a formação de vesiculas unilamelares do tensioativo. O F127 forma micelas esféricas sem carga. O grupo β-dicetona da curcumina apresenta tautomerismo ceto-enólico e modificar-se em função da polaridade, temperatura e pH do meio em que se encontra, a molécula é um ácido poliprótico porque possui três hidrogénios ionizáveis um no grupo hidróxilo do grupo enólico (pKa=8,02) e dois no grupo hidróxilo dos grupos fenólicos (pKa=8,19 e pKa=9,05). A hidrólise depende de qual das espécies de curcumina (forma molecular e ionizada) está presente. Com base nisto realizou-se o estudo da hidrólise da curcumina em: água, dissoluções aquosas de F127, DODAB e mistura F127:DODAB a diferentes pHs (3, natural (o que apresenta a solução de curcumina nos diferentes meios sem aditivos), 9, 11 e 12) e temperaturas (25, 31 y 37ºC). Os resultados obtidos põem de manifesto que em agua a molécula de curcumina degrada-se a pH< 12; enquanto a pH=12 a hidrólise é praticamente inexistente. Os resultados obtidos junto com os valores de pKa dos grupos dissociáveis, permitem concluir que só a curcumina totalmente dissociada é estável frente á hidrólise em água. A curcumina encapsulada em todos os sistemas estudados: micelas F127, vesiculas de DODAB e agregados mixtos F127:DODAB, é estável a pH< 11 e sofre degradação pouco significativa da mesma ordem que em agua a pH> 11 em F127. Estes resultados poem de manifesto que a micro-encapsulação da curcumina, tanto em sistemas neutros (F127) como catiónicos (DODAB e DODAB:F127) protege-a frente a hidrólise aquosa de forma muito eficiente no intervalo de pH estudado. Determinou-se o valor pka dos três hidrogénios dissociáveis nos diferentes meios mediante titulação acido-base e espectroscopia de absorção uv-vis. Os resultados mostram que os valores de pKa da curcumina em água, F127 e metanol são muito semelhantes pelo que as espécies presentes nestes meios a igual valor de pH são as mesmas. Nas vesiculas de DODAB e nos agregados mistos F127:DODAB os valores de pKa são menores, isto indica que os hidrogénios dissociáveis são mais ácidos, e por tanto a ionização ocorre a valores de pH mais baixos. Por tanto, a proteção da molécula de curcumina frente a hidrólise proporcionada pelas vesiculas de DODAB pode considerar-se devido a promoção da dissociação, enquanto no caso das micelas de F127 e dos agregados mistos F127:DODAB o mecanismo de proteção é diferente. Em todos os casos observa-se que a hidrólise aumenta ligeiramente com o aumento da temperatura.
- Phenolic composition and antioxidant properties of ex-situ conserved tomato (Solanum lycopersicum L.) germplasmPublication . Pinela, José; Montoya, César; Carvalho, Ana Maria; Martins, Valter; Rocha, Filomena; Barata, Ana Maria; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Tomato (Solanum lycopersicum L.) local varieties represent a reservoir of genetic diversity for desirable quality traits. In this study, a representative collection of table tomato germplasm conserved ex-situ in the Portuguese Gene Bank was characterized for its polyphenols composition and antioxidant capacity. Phenolic acids, such as caffeic and p-coumaric acids bounded to a hexose and 5-O-caffeoylquinic acid, corresponded to 71–98% of the identified phenolic compounds; while the remaining fraction consisted of quercetin and kaempferol glycoside derivatives. Among the studied tomato accessions, it was possible to identify those that stand out for the analysed bioactive traits. These findings highlighted the interest of using Portuguese tomato germplasm in breeding programs or of reintroducing into cultivation these local varieties used for fresh consumption.
- Propriedades nutricionais e compostos bioativos de acessos de tomate conservados no Banco Português de Germoplasma vegetalPublication . Martins, Valter; Pinela, José; Barros, Lillian; Carvalho, Ana Maria; Rocha, Filomena; Barata, Ana Maria; Ferreira, Isabel C.F.R.A cultura do tomate (Solanum lycopersicum L.) é uma das mais importantes do mundo e origina uma quantidade considerável de subprodutos desprovidos de valor comercial. Contudo, estes subprodutos representam uma fonte promissora de compostos bioativos com potencial aplicação em vários setores industriais. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o potencial antioxidante de partes vegetativas do tomateiro descartadas durante e após a produção de tomate para consumo em fresco. O material vegetal (lançamentos de poda em verde e plantas em fim de ciclo vegetativo) foi obtido a partir de diferentes acessos de tomateiro multiplicados no Banco de Português de Germoplasma Vegetal, em Braga. Posteriormente, as amostras foram liofilizadas, reduzidas a pó e submetidas a uma extração sólido-líquido com uma mistura de etanol:água (80:20, v/v). Após calcular o rendimento de extração, avaliou-se a atividade antioxidante dos extratos através dos ensaios in vitro da atividade captadora de radicais livres DPPH e do poder redutor. Os teores de fenóis e flavonoides totais foram quantificados recorrendo aos métodos de Folin-Ciocalteu e do cloreto de alumínio, respetivamente. Os teores de clorofila a e b foram avaliados espetrofotometricamente após uma extração com uma mistura de acetona:hexano (4:6, v/v). O material resultante da poda originou maiores rendimentos de extração (~19%) do que os subprodutos de fim de cultura (~11%). O material resultante da poda apresentou teores mais elevados de fenóis e de flavonoides totais, atingindo ~71 mg Equiv. Ácido Gálico/g de extrato e 31 mg Equiv. Catequina/g de extrato, respetivamente, em material vegetal obtido a partir de acessos de tomate amarelo. Estes extratos apresentam também os menores valores de EC50, correspondendo a uma maior atividade antioxidante. Quanto às clorofilas, estes pigmentos foram detetados em menor quantidade no material de fim de cultura, o qual apresentou também menores teores de humidade. Os resultados deste estudo preliminar destacam o potencial dos subprodutos da cultura do tomate para a obtenção de antioxidantes com potenciais aplicações na indústria alimentar e setores interessados em ingredientes bioativos.
- Caraterização morfológica e química de acessos de tomate (Solanum lycopersicum L.) conservados no Banco Português de Germoplasma VegetalPublication . Martins, Valter; Carvalho, Ana Maria; Rocha, FilomenaOs trabalhos realizados no âmbito desta dissertação de mestrado basearam-se na caracterização morfológica e química de alguns acessos de variedades regionais de Solanum lycopersicum L., armazenadas no Banco Português de Germoplasma Vegetal. Para tal procedeu-se ao cultivo das plantas de cada acesso e à respetiva descrição morfológica, recorrendo a vários descritores relativos às principais características morfológicas e agronómicas das populações em ensaio. Algumas das variedades ensaiadas, correspondentes aos acessos 16388, 11363, 12506, 11350 e 11465, obtiveram os melhores resultados, e como tal têm nas suas populações plantas com caraterísticas mais vantajosas do ponto de vista morfológico e agronómico. Realizaram-se ainda estudos analíticos para avaliar as características nutricionais e bioativas dos frutos e de material vegetal correspondente a subprodutos da cultura. Concluímos que foram os acessos 13034 e 12260 que obtiveram os melhores resultados relativamente às caraterísticas nutricionais. Quanto aos subprodutos analisados, foram os lançamentos de poda em verde que obtiveram as maiores concentrações de fenóis e flavonoides, enquanto que a parte aérea das plantas em fim de ciclo de cultivo apresentaram melhores resultados de atividade captadora de radicais DPPH e poder redutor, e também maior concentração de clorofilas. Confirma-se que o tomate contém compostos com propriedades benéficas para a saúde, e que os subprodutos da planta são uma boa fonte de compostos bioativos que podem ser reutilizados pela indústria. A identificação e análise das principais diferenças entre os acessos de variedades regionais de tomate são uma forma de valorizar a informação acerca deste germoplasma conservado, o que facilita a sua utilização quer a nível agrícola como alimentar, em programas de reintrodução em cultura e melhoramento de plantas.
- Caracterização do perfil em tocoferóis e ácidos gordos de uma coleção de germoplasma de tomate (Solanum lycopersicum L.)Publication . Martins, Valter; Pinela, José; Barros, Lillian; Carvalho, Ana Maria; Rocha, Filomena; Barata, Ana Maria; Ferreira, Isabel C.F.R.O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é uma espécie domesticada muito presente no nosso cotidiano. O fruto é consumido fresco e processado, sendo um elemento chave da Dieta Mediterrânica, que tem sido associada a várias propriedades benéficas para a saúde [1]. Com o objetivo de comprovar a presença de compostos bioativos em variedades tradicionais de tomate, os perfis em tocoferóis e ácidos gordos foram determinados em quatro acessos [12260 - coração de boi; 12437 - amarelo; 12906 - tomate; e 13034 - coração de boi] cujas sementes se encontram conservadas ex-situ no Banco Português de Germoplasma Vegetal (BPGV), em Braga. A partir de um ensaio de regeneração e multiplicação de germoplasma, realizado nos campos experimentais do BPGV selecionaram-se os frutos maduros para análise. Os perfis em tocoferóis e ácidos gordos foram determinados por cromatográfica líquida de alta eficiência acoplada a um detetor de fluorescência (HPLC-FL) e cromatografia gasosa acoplada a um detetor de ionização por chama (GC-FID) depois um processo de derivatização, respetivamente [2]. Após tratamento estatístico dos resultados, o acesso 12906 destacou-se com os teores mais elevados de γ- e δ- tocoferol e de tocoferóis totais. Já os vitâmeros α- e β-tocoferol foram detetados em maior quantidade nos frutos do acesso 12260. Relativamente aos ácidos gordos, os mais abundantes foram os ácidos linoleico (C18:2n6), palmítico (C16:0), α-linolénico (C18:3n3) e oleico (C18:1n9). Os acessos 12260, 12906 e 13034 apresentaram teores elevados de C18:2n6, enquanto que o ácido gordo saturado C16:0 abundou nos frutos do acesso 12437. Os resultados deste estudo contribuem para completar a informação relativa aos acessos de germoplasma de tomateiro conservado no BPGV, facilitando o estabelecimento de critérios para uma seleção racional de germoplasma com interesse tanto para reintrodução em cultivo como para programas de melhoramento vegetal.
- Valorisation of table tomato crop by-products: Phenolic profiles and in vitro antioxidant and antimicrobial activitiesPublication . Añibarro Ortega, Mikel; Pinela, José; Ćirić, Ana; Martins, Valter; Rocha, Filomena; Soković, Marina; Barata, Ana Maria; Carvalho, Ana Maria; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Little attention has been paid to the phenolic composition and bioactive properties of primary tomato plant by-products (Solanum lycopersicum L.) as compared to fruits. In this study, axillary green shoots resulting from pruning and aerial biomass at the end of the cultivation cycle were characterized for their composition in chlorophylls and phenolic compounds, as well as for antioxidant and antimicrobial activities. The HPLC-DAD-ESI/MSn analysis allowed identifying phenolic acids and flavonoids, with prevalence of quercetin-3-O-rutinoside (rutin). The extracts had in vitro antioxidant and antihemolytic activity, especially those produced from pruning materials. Despite their low activity against the tested microfungi, some extracts had ability to inhibit and kill some bacteria more effectively than the antibiotic ampicillin. It was interesting to conclude that table tomato crop remains, currently with no commercial value, can be used to produce extracts with antioxidant and antibacterial activities for possible use in the agri-food sector as natural preservatives.