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- Análise metabolómica dirigida em cogumelos silvestres do género Boletus.Publication . Heleno, Sandrina A.; Vieira, Vanessa; Gamalho, Azucena M.; Barros, Lillian; Martins, Anabela; Ferreira, Isabel C.F.R.Os cogumelos são muito apreciados pelas suas propriedades organolépticas e nutricionais, mas também pelas suas propriedades medicinais devido à acumulação de metabolitos bioactivos [1,2]. Neste trabalho, apresentaremos uma análise metabolómica dirigida em espécies silvestres do género Boletus provenientes do Nordeste de Portugal: B. aereus, B. edulis, B. reticulatus (comestíveis), B. purpureus, B. satanas e B. rhodoxanthus (não-comestíveis). Foram analisados metabolitos primários incluindo açúcares (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detecção por índice de refracção, HPLC-RI), ácidos gordos (cromatografia gasosa acoplada a detecção por ionização de chama, GC-FID), tocoferóis (HPLC-fluorescência) e ácido ascórbico (espectrofotometria). Analisaram-se também metabolitos secundários, nomeadamente ácidos fenólicos, por HPLC-DAD). Os metabolitos antioxidantes foram relacionados com a actividade captadora de radicais DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazilo), poder redutor e inibição da peroxidação lipídica.
- Antioxidant properties of two Lactarius wild species from the Northeast of PortugalPublication . Vieira, Vanessa; Reis, Filipa S.; Martins, Anabela; Ferreira, Isabel C.F.R.Wild mushrooms are widely appreciated not only for their organoleptic and nutritional properties, but also for their medicinal potential due to the accumulation of bioactive compounds. They have been described as a source of many antioxidant compounds such as phenolic compounds, tocopherols, ascorbic acid and carotenoids (1]. In the present work, the antioxidant properties of two wild Lactarius species from the Northeast of Portugal (Lactarius citroleus and Lactarius plumbeus) were evaluated for the first time, allowing the comparison between these two species. The antioxidant properties were determined through five different assays. The reducing power of the samples was assessed through the Folin-Ciocalteu (or total phenolics) and the Ferricyanide/Prussian blue assays. To evaluate the radical scavenging activity, the DPPH-2,2- diphenyl-1-picrylhydrazylassay was applied. Lipid peroxidation inhibition was measured through two different assays: β-carotene/linoleate (or β-carotene bleaching inhibition) and TBARSthiobarbituric- acid-reactive-species assays. Although L. plumbeus has shown the highest content in total phenolics (22.02 mg of gallic acid equivalents/g extract), L. citroleus presented the highest reducing power determined by the Ferricyanide/Prussian blue assay (EC50=1 .53 mg/ml ). L. plumbeus revealed the highest radical scavenging activity (EC50=4.18 mg/ml) as also the highest lipid peroxidation inhibition measured by β-carotene/linoleate assay (EC50=4.92 mg/ml). Nevertheless the lowest EC50 value for TSARS assay was revealed by L. citroleus (0.57 mg/ml). This study contributes for the inventorying of the wild mushroom species from the Northeast of Portugal, providing more information about the antioxidant potential of these natural matrices.
- Caracterização nutricional e bioatividade de cogumelos silvestres: Lactarius citriolens, Lactarius turpis, Leucopaxillus candidus e Morchella conicaPublication . Vieira, Vanessa; Ferreira, Isabel C.F.R.; Martins, AnabelaMorchella conica, Lactarius citriolens, L. turpis e Leucopaxillus candidus foram estudados com o intuito de fazer a sua caracterização em relação à composição química, valor nutricional e bioatividade. Amostras provenientes do Nordeste Transmontano e da Sérvia (apenas M. conica) foram submetidas a análise por técnicas cromatográficas adequadas identificação e quantificação de açúcares livres, ácidos gordos, ácidos orgânicos e compostos fenólicos. Os extratos metanólicos destas amostras foram estudados sob o ponto de vista bioativo, nomeadamente atividade antioxidante (poder redutor, atividade captadora de radicais livres e inibição da peroxidação lipídica) e, no caso de M. conica proveniente de Portugal e da Sérvia, atividade antimicrobiana (contra bactérias Gram positivo e Gram negativo, e microfungos). O valor nutricional de M. conica variou entre as duas amostras, sendo que a da Sérvia revelou a maior contribuição energética e teor em açúcares livres, ácidos gordos polinsaturados e compostos fenólicos, enquanto a amostra portuguesa foi mais rica em ácidos gordos saturados e monoinsaturados, tocoferóis e ácidos orgânicos. Em geral, a amostra de Portugal revelou o maior potencial antioxidante (com exceção da inibição da peroxidação lipídica), enquanto a da Sérvia exibiu uma maior atividade antimicrobiana. Já nas amostras do género Lactarius, a composição em macronutrientes variou entre as duas espécies, mas os perfis foram similares entre elas e relativamente a outras espécies de Lactarius; L. citriolens forneceu a maior contribuição energética, ácidos gordos saturados e ácidos orgânicos, enquanto a amostra de L. turpis foi mais rica em açúcares livres, ácidos gordos mono e polinsaturados, tocoferóis e compostos fenólicos. O extrato metanólico de L. turpis apresentou a maior atividade antioxidante. Por fim, L. candidus mostrou ser uma espécie interessante quanto ao valor nutricional, com alto teor de proteínas e hidratos de carbono, mas baixos níveis de lípidos, com a prevalência de ácidos gordos polinsaturados. O manitol foi o principal açúcar presente e o β-tocoferol a principal isoforma de tocoferóis. Outros compostos detetados foram os ácidos oxálico, fumárico, p-hidroxibenzóico e cinâmico. A ausência de citotoxicidade dos extratos foi confirmada numa cultura primária de células de fígado porco através do ensaio de sulforrodamina B. O presente trabalho fornece novas informações sobre as espécies em estudo, nomeadamente em relação às suas propriedades químicas, nutricionais e bioativas.
- Chemical and organoleptic properties of bread enriched with Rosmarinus officinalis L.: the potential of natural extracts obtained through green extraction methodologies as food ingredientsPublication . Kessler, Júlia C.; Vieira, Vanessa; Martins, Isabel M.; Manrique, Yaidelin A.; Ferreira, Patrícia; Calhelha, Ricardo C.; Afonso, Andreia; Barros, Lillian; Rodrigues, Alírio; Dias, Madalena M.The potential of R. officinalis L. (RO) extracts as a source of aromas was accessed by hydrodistillation (HD) and supercritical fluid extraction using carbon dioxide (SFE-CO2), followed by a series of analysis: quantification by GC-MS, sensory perception and description, and cytotoxicity against Vero cells. The extracts shown abundancy of α-pinene, eucalyptol, S-verbenone and camphor, contributing for the green, fresh, citric, and woody as main sensory notes. The odour threshold (ODT) value (less than 3.0 × 10- 3 μg⋅mL- 1) and the cytotoxic potential (ca. 220 μg∙mL- 1) defined the concentration range for food application. The most promising extract was added to bread doughs and the final volatile profile was characterised by GC-MS through HS-SPME over time. Among the 34 compounds found, furfural showed an evident contribution in the bread crust aroma, which persisted over four hours of storage, contributing to a pleasant bread fragrance according to the evaluators. This study aims to represent a stepping stone for the use of natural aromas as ingredients for the development of innovative food products.
- Chromatographic analysis of nutraceuticals in the wild mushroom Suillus granulatus from different originsPublication . Reis, Filipa S.; Vieira, Vanessa; Barros, Lillian; Martins, Anabela; Stojković, Dejan; Soković, Marina; Ćirić, Ana; Glamočlija, Jasmina; Ferreira, Isabel C.F.R.Wild-growing mushrooms consumption has been preferred to cultivated species in many countries of central and Eastern Europe and the majority of the collected mushrooms are used for pickers' own consumption. Hence, in recent times, the consumption of mushrooms has risen greatly, comprising a large number of species with excellent properties, being rich in protein and minerals and low in calories [1]. Another reason for the rise in consumption is the combination of their value as a food as well as their medicinal and nutraceutical values [2]. This work presents the profiles of fatty acids, free sugars and tocopherols of the wild species Suillus granulatus from Portugal and Serbia, comparing the results with each other. Fatty acids were determined by GC-FID and free sugars and tocopherols were analysed by HPLC coupled to a refraction index (RI) and fluorescence detector, respectively. The mentioned profiles did not differ much between both samples from this species. Concerning fatty acids, polyunsaturated fatty acids were found in higher percentages, being linoleic and α-linolenic acids the prevailing fatty acids found in the Portuguese sample, and oleic acid and linoleic acids the prevailing fatty acids quantified in the Serbian one. The free sugars profiles were also similar, once it was possible to quantify fructose, mannitol and trehalose in both species and the total concentration values were also identical (12.77 g/100 g dw for the Portuguese sample and 12.68 g/100 g dw for the Serbian species). Regarding tocopherols, the four isoforms of vitamin E (α-, β-, Υ- and δ-tocopherol) were detected in the Serbian mushroom (219.92 ~g/100g dw of total tocopherols); however the Portuguese sample did not reveal the presence of the y-tocopherol isoform (294.94 ~g/100g dw of total tocopherols). With this work, we were able to confirm that mushrooms can be a source of nutraceuticals, such as unsaturated fatty acids, monosaccharides or disaccharides, and vitamins. Despite chemical profiles being highly influenced by the environmental conditions, Suillus granulatus sample from two different countries presented similar profiles of the analyzed molecules.
- Corrigendum to “chemical and organoleptic properties of bread enriched with Rosmarinus officinalis L.: the potential of natural extracts obtained through green extraction methodologies as food ingredients”Publication . Kessler, Júlia C.; Vieira, Vanessa; Martins, Isabel M.; Manrique, Yaidelin A.; Ferreira, Patrícia; Calhelha, Ricardo C.; Afonso, Andreia; Barros, Lillian; Rodrigues, Alírio; Dias, Madalena M.The authors regret the inconvenience caused but found an error in the text of section 2.5.3 - “Sensory evaluation of the aroma of bread” of the article. It should read “Four concentrations of R. officinalis extract were used: 0.0, 0.5, 1.0 and 2.0 μL/100 g of bread.” instead of “Four concentrations of R. officinalis extract were used: 0.0, 0.5, 1.0 and 2.0 g/100 g of bread.” The authors would like to apologise for any inconvenience caused.
- Efeitos sinergistas da atividade antioxidante de cogumelos comestíveis: mistura de extratos fenólicos e polissacarídicos de Boletus edulis e Marasmius oreadesPublication . Marques, Azucena; Vieira, Vanessa; Barros, Lillian; Barreira, João C.M.; Ferreira, Isabel C.F.R.Os cogumelos são uma excelente fonte de proteínas, glúcidos, fibras e vitaminas. Constituem um alimento muito apreciado devido essencialmente ao seu aroma e textura, sendo preparados/processados de diversas formas, ou utilizados como aromatizantes em sopas e molhos [1]. São ainda conhecidos pela sua bioatividade, quer antimicrobiana, antitumoral ou antioxidante. Neste trabalho, avaliou-se a atividade antioxidante de diferentes misturas de Marasmius oreades e Boletus edulis (12,5/87,5, 25/75, 50/50, 75/25, 87,5/12,5) e comparou-se com os controlos (amostras individuais), com o objetivo de verificar qual das misturas contribui para efeitos sinergistas. As propriedades antioxidantes foram avaliadas por quatro métodos químicos e bioquímicos, sendo ainda determinados os fenóis totais (extratos fenólicos) e o teor em polissacáridos (extratos polissacarídicos). Foram observadas três tipos de interações utilizando as diferentes misturas de cogumelos: efeitos aditivos, sinergistas e antagonistas. Os resultados obtidos mostraram diferentes comportamentos nos ensaios de atividade antioxidante de acordo com as proporções utilizadas, indicando que as misturas de cogumelos permitem a ocorrência de diferentes interações químicas entre os compostos obtidos em cada espécie. Todas as diferentes proporções utilizadas de cada cogumelo demonstraram ter atividade antioxidante e, independentemente das proporções utilizadas, os extratos polissacarídicos apresentaram maior atividade antioxidante que os extratos fenólicos. Verificou-se também que a mesma mistura pode induzir um efeito sinergista num método de atividade antioxidante e um efeito antagonista noutro método de atividade antioxidante. Estes resultados indicam que existem diferentes composições de compostos antioxidantes em cada espécie de cogumelo, demostrando também que a proporção de cada cogumelo deve ser definida considerando o efeito específico a que se destina: poder redutor, capacidade captadora de radicais livres ou inibição da peroxidação lipídica.
- Efeitos sinergistas da atividade antioxidante de cogumelos comestíveis: mistura de extratos fenólicos e polissacarídicos de Boletus edulis e Marasmius oreades.Publication . Marques, Azucena; Vieira, Vanessa; Barros, Lillian; Barreira, João C.M.; Ferreira, Isabel C.F.R.Neste trabalho, avaliou-se a atividade antioxidante de diferentes misturas de Marasmius oreades e Boletus edulis (12,5/87,5, 25/75, 50/50, 75/25, 87,5/12,5) e comparou-se com os controlos (amostras individuais), com o objetivo de verificar qual das misturas contribui para efeitos sinergistas. As propriedades antioxidantes foram avaliadas por quatro métodos químicos e bioquímicos, sendo ainda determinados os fenóis totais (extratos fenólicos) e o teor em polissacáridos (extratos polissacarídicos). Foram observadas três tipos de interações utilizando as diferentes misturas de cogumelos: efeitos aditivos, sinergistas e antagonistas. Os resultados obtidos mostraram diferentes comportamentos nos ensaios de atividade antioxidante de acordo com as proporções utilizadas, indicando que as misturas de cogumelos permitem a ocorrência de diferentes interações químicas entre os compostos obtidos em cada espécie. Todas as diferentes proporções utilizadas de cada cogumelo demonstraram ter atividade antioxidante e, independentemente das proporções utilizadas, os extratos polissacarídicos apresentaram maior atividade antioxidante que os extratos fenólicos. Verificou-se também que a mesma mistura pode induzir um efeito sinergista num método de atividade antioxidante e um efeito antagonista noutro método de atividade antioxidante.
- Enhanced extraction of phenolic compounds using choline chloride based deep eutectic solvents from Juglans regia L.Publication . Vieira, Vanessa; Prieto Lage, Miguel A.; Barros, Lillian; Coutinho, João A.P.; Ferreira, Isabel C.F.R.; Ferreira, OlgaThe extraction of phenolic compounds from walnut leaves (Juglans regia L.) was optimized using heat-assisted extraction and deep eutectic solvents based on choline chloride and carboxylic acids. A preliminary solvent screening was performed using a selected group of carboxylic acids as hydrogen bond donors, showing that the highest extraction yield of phenolic compounds was obtained using choline chloride mixtures with butyric or phenylpropionic acid at a mole ratio 1:2, with 20% of water (w/w). The extraction conditions (time, temperature and water proportion) were then optimized by an experimental design, assisted by response surface methodology. To evaluate the response, the three most abundant compounds identified by HPLC (neochlorogenic acid, quercetin 3-O-glucoside and quercetin O-pentoside) were quantified. Additionally, the solid/liquid ratio effect at the optimal conditions, in dose-response format, was studied in view of its upscale, not showing any significant decrease until 140 g/L. The results here presented provide valuable information towards the design of a process in a pre-industrial form for the extraction of phenolic compounds from J. regia leaves using deep eutectic solvents.
- Evaluation of human tumor cell lines growth inhibition by Leccinum vulpinum Watling and Suillus granulatus (L.) RousselPublication . Vieira, Vanessa; Reis, Filipa S.; Calhelha, Ricardo C.; Martins, Anabela; Ferreira, Isabel C.F.R.Mushrooms comprise a vast and not yet totally explored source of powerful new pharmaceutical products. In particular, and most importantly for modern medicine, they represent an unlimited source of compounds which are modulators of tumour cell growth [1]. In the present work, the anti-proliferative properties of two methanolic extracts of wild mushroom species from the Northeast of Portugal (Leccinum vulpinum Watling and SuilIus granulatus (L.) Roussel) were evaluated for the first time, allowing the comparison between these two species. These properties were measured by sulforhodamine 8 (SRB) assay according to the procedure adopted in the NCI's in vitro anticancer drug screening, observing their growth inhibitory activity. MCF-7 (breast carcinoma), NCI-H460 (non-small lung carcinoma), HCT-15 (colon carcinoma) and HeLa (cervical carcinoma) human cells lines were used. The concentration that inhibited growth in 50% is expressed in Gl50. Both species were able to inhibit the proliferation of all the tested cell lines. Nevertheless, the most susceptible cell line was HCT-15: Gl50 values 71.31±5.26 μg/ml for S. Ganulatus and 77.61±2.22 μg/ml for L. vulpinum. Up to 400 μg/ml, the samples did not show toxicity for non-tumor porcine liver primary cells. This study contributes for the valorisation of the mentioned mushroom species due to their anti-proliferative properties against human tumor cell lines.
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