| Name: | Description: | Size: | Format: | |
|---|---|---|---|---|
| 1008.95 KB | Adobe PDF |
Authors
Advisor(s)
Abstract(s)
Trioza erytreae (Hemiptera, Psylloidea) is an important citrus pest being also one of the vectors of Candidatus Liberibacter spp., the causal bacterial agents of citrus HUANGLONGBING (greening) disease, deemed as the most devastating disease for citrus crops. In 2014, T. erytreae was detected in NW Iberian Peninsula, being the first detection of the pest in continental Europe. The spreading of T. erytreae towards Iberian Peninsula is being fast, threatening the citrus production in Europe. Due to the progressively strict EU policies on pesticides, their harmful effects and not successful eradication of T. erytreae attempts, the use of insecticides is regarded as impracticable. Thus, biocontrol using natural enemies is seen as an environmentally sound and effective approach to limited this pest. Hence, the main goal of this work was to develop PCR- based diagnostic methods that can detect for the presence of DNA from T. erytreae in the gut of arthropod predators. Fifteen T. erytreae species-specific primer sets targeting the mitochondrial COI, SSU and LSU regions were designed and tested for their specificity and sensitivity against phylogenetically-related psyllids. Among the 15 primers sets tested, two targeting the COI gene (T3F - T2R) and the rrnL gene (LSU_F2LSU_R1) showed to be highly specific and sensitive to detected T. erytreae DNA, inclusively when mixed at equal ratios with DNA of closely-related taxa of Trioza. The small size of the fragment amplified by these two primer sets (199 bp and 291 bp, for T3F - T2R and LSU_F2-LSU_R1, respectively), suggested their suitability to detected fragmented T. erytreae DNA in the gut of potential predators. Despite these promising results, the feasibility of these primer sets to recognize predators collected in natural settings must be validated in future works.
Trioza erytreae (Hemiptera, Psylloidea) é uma importante praga dos citrinos, sendo também um dos vetores de Candidatus Liberibacter spp., o agente causal da doença huanglongbing (greening) dos citrinos, e considerada como sendo a mais devastadora na citricultura. Em 2014, foi detetada a presença de T. erytreae no noroeste da Península Ibérica, tendo sido esta a primeira vez reportada na Europa continental. A dispersão de T. erytreae na Península Ibérica esta a decorrer de forma rápida, ameaçando a produção de citrinos na Europa. Devido às políticas cada vez mais rigorosas da UE sobre o uso de pesticidas, os seus efeitos nocivos e tentativas fracassadas de erradicação de T. erytreae, tem levado à procura de alternativas. Assim, o biocontrolo usando inimigos naturais é visto como uma abordagem ambientalmente correta e eficaz para limitar esta praga. Assim, o principal objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de diagnóstico baseados em PCR que permita detetar a presença de DNA de T. erytreae no intestino de predadores artrópodes. Quinze conjuntos de primers específicos de T. erytreae foram desenhados nas regiões mitocondriais COI, SSU e LSU, e testados quanto à sua especificidade e sensibilidade contra psilídeos filogeneticamente próximos de Triosa. De entre os 15 conjuntos de primers testados, dois desenhados no gene COI (T3F - T2R) e no gene rrnL (LSU_F2-LSU_R1) mostraram elevada especificidade e sensibilidade ao DNA de T. erytreae, permitindo a sua deteção quando misturado em proporções iguais com DNA de espécies taxonomicamente relacionados com Trioza. O reduzido tamanho do fragmento amplificado por estes dois conjuntos de primers (199 pb e 291 pb, para T3F - T2R e LSU_F2-LSU_R1, respetivamente), sugere a sua adequação para detetar fragmentos de DNA de T. erytreae no intestino de potenciais predadores. Apesar destes resultados promissores, a viabilidade dos dois conjuntos de primers para reconhecer predadores coletados em ambientes naturais deve ser validada em trabalhos futuros.
Trioza erytreae (Hemiptera, Psylloidea) é uma importante praga dos citrinos, sendo também um dos vetores de Candidatus Liberibacter spp., o agente causal da doença huanglongbing (greening) dos citrinos, e considerada como sendo a mais devastadora na citricultura. Em 2014, foi detetada a presença de T. erytreae no noroeste da Península Ibérica, tendo sido esta a primeira vez reportada na Europa continental. A dispersão de T. erytreae na Península Ibérica esta a decorrer de forma rápida, ameaçando a produção de citrinos na Europa. Devido às políticas cada vez mais rigorosas da UE sobre o uso de pesticidas, os seus efeitos nocivos e tentativas fracassadas de erradicação de T. erytreae, tem levado à procura de alternativas. Assim, o biocontrolo usando inimigos naturais é visto como uma abordagem ambientalmente correta e eficaz para limitar esta praga. Assim, o principal objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de diagnóstico baseados em PCR que permita detetar a presença de DNA de T. erytreae no intestino de predadores artrópodes. Quinze conjuntos de primers específicos de T. erytreae foram desenhados nas regiões mitocondriais COI, SSU e LSU, e testados quanto à sua especificidade e sensibilidade contra psilídeos filogeneticamente próximos de Triosa. De entre os 15 conjuntos de primers testados, dois desenhados no gene COI (T3F - T2R) e no gene rrnL (LSU_F2-LSU_R1) mostraram elevada especificidade e sensibilidade ao DNA de T. erytreae, permitindo a sua deteção quando misturado em proporções iguais com DNA de espécies taxonomicamente relacionados com Trioza. O reduzido tamanho do fragmento amplificado por estes dois conjuntos de primers (199 pb e 291 pb, para T3F - T2R e LSU_F2-LSU_R1, respetivamente), sugere a sua adequação para detetar fragmentos de DNA de T. erytreae no intestino de potenciais predadores. Apesar destes resultados promissores, a viabilidade dos dois conjuntos de primers para reconhecer predadores coletados em ambientes naturais deve ser validada em trabalhos futuros.
Description
Keywords
African citrus psyllid HUANGLONGBING Natural enemies COI SSU LSU