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- Caracterização do perfil fenólico de Ocimum basílícum var. purpurascens e avaliação do seu potencial bioativoPublication . Fernandes, Filipa A.; Pereira, Eliana; Barros, Lillian; Soković, Marina; Calhelha, Ricardo C.; Ferreira, Isabel C.F.R.As plantas possuem na sua composição vários compostos de interesse, particularmente compostos fenólicos, que se classificam como moléculas bioativas, exercendo funções benéficas para a saúde humana [ l ]. Ocimum basilicum var. purpurascens (popularmente conhecido por manjericão vermelho rubi) é uma planta anual, pertencente à família das Lamiaceae, resultando a sua cor púrpura da elevada concentração em compostos antociânicos. Esta variedade de O. basilicum é usada como planta ornamental, embora o seu óleo essencial seja utilizado na medicina popular [2]. O objetivo deste trabalho consistiu em avaliar o conteúdo em compostos fenólicos, bem como as propriedades bioativas (atividade antioxidante, citotoxiddade e atividade antimicrobiana) de um extrato hidroetanólico (80:20, vi v) de manjericão vermelho rubi. A determinação do perfil fenólico foi realizada através de um sistema de HPLC-DAD-ESI/ MS, a atividade antioxidante foi avaliada através de três ensaios in vitro (atividade captadora de radicais DPPH, poder redutor e mibição da descoloração do (3-caroteno), a citotoxicidade foi determinada com recurso a linhas celulares tumorais (HepG2, NCI-H460, MCF-7 e HeLa), e a uma cultura de células primárias não tumorais (PLP2), aplicando o ensaio da sulforrodamina B e, por fim, a atividade antimicrobiana foi analisada através do método de microdiluição em bactérias Gram-positivo e Gram-negativo, e em fungos. No extrato de manjericão vermelho rubi foi evidente a presença de 26 compostos fenólicos, dos quais 13 foram identificados como compostos fenólicos não antociânicos, destacando-se o ácido rosmarínico como composto maioritário, e 13 compostos antociânicos, no qual a cianidina-3-(6, 6'-di-p-cumaroil)-soforosil-5-glucósido foi o composto mais abundante. Relativamente ao potencial bioativo desta espécie, o extrato revelou atividade antioxidante, evidenciando-se o ensaio da atividade captadora de radicais DPPH com valores de EC^ = 60 |^g/mL. Foi também notório, no ensaio da atividade citotóxica, a ausência de capacidade antiproliferativa em todas as linhas celulares testadas mas, também, ausência de toxicidade do extrato para células não tumorais (GI >400 |^g/mL). Relativamente à atividade antimicrobiana, os resultados obtidos foram satisfatórios para a maioria das bactérias testadas, mas também nos fungos; apresentando estes últimos valores de MIC (concentração mínima inibitória) inferiores, comparativamente às bactérias estudadas. Os resultados obtidos neste estudo permitem concluir que o manjericão vermelho rubi é uma planta rica em moléculas bioativas, nomeadamente compostos antociânicos e não-antociânicos, que suscitam elevado interesse ao nível de vários setores industriais, tal como o farmacêutico e o alimentar.
- Caraterização química e nutricional de uma espécie de elevado interesse na indústria alimentar: Ocimum basílicum var. purpurascensPublication . Fernandes, Filipa A.; Pereira, Eliana; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.O reino das plantas é composto por uma grande variedade de espécies de elevada importância para a alimentação dos seres heterotróficos, devido à sua composição em nutrientes e moléculas de elevado interesse [l]. O género Ocimum compreende mais de 150 espécies e é considerado um dos maiores géneros da família Lamiaceae, onde se inclui Ocimum basilicum var. purpurascens, conhecido como manjericão vermelho rubi [2] Assim sendo, não só o manjericão é uma planta consumida mundialmente, tornando-se uma espécie de grande relevância, mas também as suas variedades, como é o caso do manjericão vermelho rubi. O objetivo deste trabalho consistiu em caracterizar as folhas do manjericão vermelho rubi a nível nutricional (teor em humidade, cinzas, proteínas, gorduras, hidratos de carbono e energia) e a nível químico através do perfil em açúcares livres, ácidos orgânicos, tocoferóis e ácidos gordos. O perfil nutricional foi avaliado utilizando metodologias oficiais de análise de produtos alimentares [3], os açúcares livres foram identificados através de um sistema de HPLCRI, os ácidos orgânicos por UFLC-PDA, os tocoferóis por HPLC-fluorescência e os ácidos gordos por GC-FID. Relativamente ao valor nutricional, destacou-se o teor em hidratos de carbono, como o macronutriente presente em maior quantidade, apresentando valores de 7,17 g/100 g de massa fresca (mf). De outro modo, a fração lipídica da amostra revelou apenas 0,36 g/100 g mf, sendo o macronutriente presente em menor quantidade e a energia total foi 41,22 kcal/100 g mf. Na avaliação dos compostos hidrofílicos, as folhas de manjericão vermelho rubi revelaram a presença de vários compostos, nomeadamente quatro moléculas de açúcares livres e sete ácidos orgânicos, destacando-se a glucose (0,040 g/100 g mf) e o ácido quínico (7,4 g/100 g mf), respetivamente. Relativamente aos compostos lipofílicos, particularmente os tocoferóis, foram detetadas as isoformas a-> P> Y- e ô-tocoferol, sendo o y-tocoferol a isoforma mais abundante (34, 6 mg/100 g mf). No que concerne ao perfil de ácidos gordos, foram identificados vinte compostos, destacando-se o ácido a-linolénico (C18:3n3, 53,79%), seguido dos ácidos palmítico (C16:0; 16, 75%), linoleico (C18:2n6; 6,6 %) e oleico (C18:ln9; 5,20%); todos os^restantes apresentação concentrações inferiores a 5%. Os resultados obtidos demonstram que esta variedade de manjericão vermelho rubi pode ser consumida como fonte de nutrientes, sendo também destacado o seu potencial como fonte de compostos de interesse naturais para aplicação na indústria alimentar e/ ou farmacêutica.
- Chemical profile of nutraceutical formulations with natural preservativesPublication . Fernandes, Filipa A.; Mandim, Filipa; Carocho, Márcio; Heleno, Sandrina A.; Dias, Maria Inês; Barros, Lillian; Simal-Gandara, Jesus; Prieto Lage, Miguel A.; Ferreira, Isabel C.F.R.Nutraceutical is a recent term, not having a formal regulatory definition, it was first defined by Stephen DeFelice as “food or part of a food that provides medical or health benefits, including the prevention and/or treatment of a disease”1. From early ages, the medicinal properties of plants were well known, and there are now many scientific studies that support such claims. Aloe Arborescens Mill., one of the most abundant species of the Aloe genus, native to South Africa having been imported into many countries as an ornamental and medicinal plant due to its biological effects (antimicrobial, anti-inflammatory and healing properties), has had its benefits proven by scientific studies2. Growing concerns about the quality and safety of food and pharmaceutical products leads to consumers prefering products with minimal added additives3. Thus, in line with consumer demand, the food industry has been working on uncovering natural preservatives. The objective of this work was to study the influence of natural preservative ingredients (citric acid and chestnut flowers) on the chemical profile (composition in free sugars, organic acids, fatty acids and phenolic compounds) of a nutraceutical based on Aloe arborescens and honey. Free sugars were identified by an HPLC-RI system, organic acids by UFLC-PDA, fatty acids by GC-FID and phenolic compounds by HPLC- DAD-ESI/MS. The results were compared with those obtained in the formulations with an artificial preservative (sodium benzoate) and with no preservative. Regarding the results, in general, there were no significant differences between formulations. In the evaluation of hydrophilic compounds, three sugar molecules (fructose – 13 g/100 g fw; glucose – 12 g/100 g fw; trehalose – 0.3 g/100 g fw) and two organic acids (malic acid – 0.40 g/100 g fw; citric acid - 0.04 g/100 g fw) were found. Regarding the fatty acid profile, seventeen compounds were identified, especially palmitic (C16:0 37%), followed by stearic acid (C18:0 14%); all the other fatty acids were below 10%. Saturated fatty acids (SFA) were the most abundant group with 89%, followed by 7% of monounsaturated fatty acids (MUFA) and 4% polyunsaturated fatty acids (PUFA). Regarding phenolic compounds, ten molecules were identified and quantified (two phenolic acids, three flavonoids, two aloins and three other anthraquinones), with a highlight for aloenin (flavonoid) as the major compound (0.14 μg/100 g fw). The results obtained in this study allow us to conclude that the natural preservatives used have no influence on the chemical composition of the nutraceutical studied. However, further research is needed to conclude that these natural preservatives are a good alternative to sodium benzoate or any other synthetic preservative.
- Desenvolvimento e aplicação de um revestimento conservante natural para fiambres; perfil físico-químico e estabilidadePublication . Fernandes, Filipa A.; Carocho, Márcio; Heleno, Sandrina A.; Rodrigues, Paula; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Grande parte do plástico produzido é aplicado na conservação de alimentos, no entanto há cada vez mais estudos que confirmam a migração dos seus aditivos para as matrizes alimentares, sendo prejudiciais para a saúde do consumidor. É também notória a contribuição do plástico para a poluição do planeta. Assim, as indústrias procuram alternativas à utilização de plástico, sendo os revestimentos comestíveis e biodegradáveis uma opção viável [1,2]. O objetivo deste trabalho consistiu em verificar a eficácia de um revestimento conservante edível, à base de ingredientes naturais (extrato aquoso de alecrim e carragenina), através de estudos de crescimento microbiano e de características físico-químicas (textura, humidade e cor) em fiambre durante 15 dias de acondicionamento. Para verificar o crescimento microbiano no fiambre, contaminaram-se amostras de fiambre, com diferentes microrganismos (coliformes e Escherichia coli; leveduras e bolores; bactérias psicrotróficas; e Staphylococcus aureus) que foram sujeitos a revestimentos de conservação distintos (revestimento edível, revestimento com filme de plástico comercial, ambos os revestimentos e, finalmente uma amostra sem qualquer tipo de revestimento, servindo de controlo). Foi posteriormente analisada a quantidade de microrganismos ao longo de 15 dias de acondicionamento a 5ºC pelo método da contagem em placa. A textura foi analisada através de um texturómetro (TA.XT Plus, Stable Micro Systems), a humidade foi calculada com base na perda de água durante o tempo de armazenamento, e a medição da cor foi realizada com um colorímetro (CR400 portátil da Konica Minolta). De uma forma geral, em termos de carga microbiana, verificou-se que as amostras capazes de reter a humidade durante o tempo de armazenamento apresentam maior contagem de microrganismos. Para os coliformes, usados como indicadores de higiene sanitária e de contaminantes fecais, o fiambre imerso na solução conservante apresentou menor contagem, comprovando seu valor antimicrobiano em relação a estes microrganismos. Também se verificou, que para todos os microrganismos testados, nas etapas finas de armazenamento o fiambre com o revestimento natural apresentou maior atividade antimicrobiana, uma vez que a contagem de microrganismos foi menor. Em relação à textura, verificou-se que tanto o tempo como o tipo de armazenamento têm influência significativa. Assim, constatou-se que com o tempo a dureza das amostras sujeitas ao armazenamento com o revestimento edível aumentou, embora a adesividade tenha sido reduzida. A elasticidade, a coesão e a resiliência não variaram muito ao longo do tempo em nenhum dos tratamentos aplicados, contudo houve uma alta variação na mastigabilidade. Relativamente à humidade, o revestimento edível não conseguiu manter a mesma percentagem de água no fiambre que o filme de plástico comercial (como era esperado), no entanto, obtiveram-se melhores resultados que na amostra controlo (sem qualquer tipo de revestimento). Para o parâmetro da cor, constatou-se que as amostras com o revestimento edível preservaram melhor a cor que as amostras armazenadas com filme plástico, pois as primeiras mostraram uma tendência amarelada ao longo do tempo, evitando um aumento da cor azul (cor indesejada para produtos à base de carne). Os resultados obtidos neste estudo mostram que a solução conservante apresenta um alto potencial na conservação de fiambre, o que tem suscitado um elevado interesse por parte da indústria alimentar.
- Dragon fruits as an alternative source of colorants: evaluation of antibacterial activity and colouring capacityPublication . Roriz, Custódio Lobo; Dias, Maria Inês; Reis, Filipa S.; Pires, Tânia C.S.; Alves, Maria José; Fernandes, Filipa A.; Morales, Patricia; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Betalains are a group of secondary metabolites named chromoalkaloids that are synthesized from tyrosine. These compounds have gained some attention in the last few years mainly due to their interesting bioactive potential, namely antioxidant, antimicrobial, and other bioactive properties [1]. Their strong and vibrant colours are also one of the characteristics by which these compounds have gained visibility in the food and pharmaceutical industries [2]. Betalains can be divided in two groups regarding the colour range: betaxanthins in the orange to yellow range, and betacyanins in the purple to pink range. Thereby, these compounds can be used as natural colouring agents, providing alternatives to the massively used artificial counterparts [3]. Although there are already some natural options in the market, these are not enough to meet the needs of the food industry, due to the growing concern of consumers regarding what they eat. Thus, the objectives of this work were to: i) obtain bioactive extracts and with strong colouring capacity from the epicarp of two pitaya varieties, white-fleshed pitaya Hylocereus undatus (Haworth) Britton & Rose (WFP) and red-fleshed pitaya Hylocereus costaricensis (F.A.C.Weber) Britton & Rose (RFP); ii) chemically characterize the betalains’ content through HPLC-DAD-ESI/MS; iii) evaluate the bioactive properties of the extracts, namely antimicrobial activity. The extracts were obtained through a dynamic maceration assisted by heat, and the betacyanins’ profile was characterized by HPLC-DAD-ESI/MS. The antibacterial capacity was determined against a panel of Gram-negative and Gram-positive bacteria using the colorimetric method of rapid detection with p-iodonitrotetrazolium chloride (INT), and the responses obtained were expressed as minimum inhibitory (MIC) and minimum bactericidal (MBC) concentrations. By the chromatographic analysis of the extracts it was possible to identify six compounds in both samples. For the WFP the major compounds identified were 6'-O-malonylbetanin (phylocactin), followed by 4'-malonyl-betanin, while for the RFP the major compound found was phylocactin. In the evaluation of the antibacterial activity, both extracts showed MIC and MBC values that ranged from 10 to 20 mg/mL. Gram-positive bacteria showed to be more susceptible to both extracts then the negative strains. Further studies need to be conducted to better understand the correlation between the bioactive potential and the betacyanins’ composition. Nevertheless, these natural matrixes proved to be viable alternatives for obtaining colouring extracts with antimicrobial properties.
- Effect of natural preservatives on the nutritional profile, chemical composition, bioactivity and stability of a nutraceutical preparation of aloe arborescensPublication . Fernandes, Filipa A.; Carocho, Márcio; Heleno, Sandrina A.; Rodrigues, Paula; Dias, Maria Inês; Pinela, José; Prieto Lage, Miguel A.; Simal-Gandara, Jesus; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Citric acid, quercetin, dried chestnut flowers and an aqueous extract of chestnut flowers were screened as candidates for preserving a drinkable nutraceutical preparation for 45 days. The assays encompassed antioxidant and antimicrobial activities, nutritional and chemical profiles, and individual profiles of fatty acids and mineral composition, all of which in comparison with a sodium benzoate, a synthetic preservative. The centesimal composition of the nutraceutical formulation was mainly composed of carbohydrates, followed by proteins and fat, with moisture levels between 66% and 71%. Palmitic and stearic acid were the most abundant fatty acids, while calcium and magnesium where the minerals in higher amount. Anthroquinones, followed by flavonoids where the most abundant groups of phenolic compounds. In terms of the preserving e ects of the extracts, the chestnut flowers and the citric acid were the most e ective natural preservatives, which better preserved phenolic compounds. Furthermore, these two ingredients also revealed the strongest capacity to control the microbial growth in the formulation by inhibiting the growth of food contaminants. In general, these ingredients revealed higher preservation capacity than sodium benzoate, while not altering the nutritional and fatty acid profile. The chestnut flowers and citric acid could be used to preserve foods, food supplements, and nutraceutical formulations after passing the required regulatory procedures for food additives.
- Evaluation of the antibacterial activity and colouring capacity of two Hylocereus spp. EpicarpsPublication . Roriz, Custódio Lobo; Dias, Maria Inês; Reis, Filipa S.; Pires, Tânia C.S.; Alves, Maria José; Fernandes, Filipa A.; Morales, Patricia; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Betalains are a group of secondary metabolites named chromoalkaloids that are synthesized from tyrosine. These compounds have gained some attention in the last few years mainly due to their interesting bioactive potential, namely antioxidant, antimicrobial, and other bioactive properties [1]. Their strong and vibrant colours are also one of the characteristics by which these compounds have gained visibility in the food and pharmaceutical industries [2]. Betalains can be divided in two groups regarding the colour range: betaxanthins in the orange to yellow range, and betacyanins in the purple to pink range. Thereby, these compounds can be used as natural colouring agents, providing alternatives to the massively used artificial counterparts [3]. Although there are already some natural options in the market, these are not enough to meet the needs of the food industry, due to the growing concern of consumers regarding what they eat.
- Ingredientes naturais como agentes conservantes: aplicação em formulações nutracêuticasPublication . Fernandes, Filipa A.; Carocho, Márcio; Heleno, Sandrina A.; Rodrigues, Paula; Dias, Maria Inês; Pinela, José; Barros, Lillian; Simal-Gandara, Jesus; Prieto Lage, Miguel A.; Ferreira, Isabel C.F.R.A crescente preocupação dos consumidores pela segurança dos produtos alimentares, leva a uma preferência por produtos sem aditivos artificiais [1], aumentando a procura de aditivos naturais por parte da indústria. Assim, o objetivo principal deste trabalho consistiu no estudo de ingredientes naturais de reconhecida bioatividade (ácido cítrico e flor de castanheiro) como conservantes de uma formulação nutracêutica comercial à base de Aloe arborescens Mill., em substituição do conservante artificial já utilizado (benzoato de sódio). Estas formulações foram posteriormente caracterizadas relativamente ao seu valor nutricional [2] (teor em minerais, humidade, cinzas, proteínas, gordura total, hidratos de carbono e energia), perfil individual em açúcares livres (HPLC-RI), ácidos orgânicos (UFLC-PDA), ácidos gordos (GC-FID) e compostos fenólicos (HPLC-DAD-ESI/MS); e ainda em termos de atividade antioxidante através da inibição da peroxidação lipídica em tecidos cerebrais de porco (TBARS) e da inibição da hemólise oxidativa (OxHLIA). Foram preparadas formulações diferentes com o objetivo de avaliar a capacidade dos ingredientes naturais na inibição do crescimento microbiano, tendo sido contaminadas com diferentes microrganismos (Escherichia coli, Bacillus cereus, Aspergillus parasiticus e Zygosaccharomyces rouxii) e, posteriormente, analisadas quanto à quantidade destes microrganismos ao longo de 45 dias. Todos os resultados foram comparados com os obtidos nas formulações com o conservante artificial (benzoato de sódio) e sem conservante. Não se verificaram diferenças significativas entre as formulações. Os hidratos de carbono foram encontrados em maior quantidade (99 g/100 g de massa fresca (mf)), seguidos do teor em proteínas (0,39 g/100 g mf), enquanto que a gordura total apresenta o menor conteúdo (0,05 g/100 g mf); o valor médio de energia foi de 397 kcal/100 g mf. Foram encontrados diferentes minerais (potássio, sódio, cálcio, magnésio, manganês, zinco, ferro e cobre), sendo o cálcio o maioritário com um valor médio de 105 mg/100 g mf. Foram também identificados os açúcares, frutose, glucose e trealose, e dois ácidos orgânicos, destacando-se a frutose (13 g/100 g mf) e o ácido málico (0,40 g/100 g mf), respetivamente. Foram quantificados dezassete ácidos gordos com maior abundância dos ácidos palmítico (C16:0, 37%) e esteárico (C18:0, 14%). Relativamente aos compostos fenólicos foi evidente a presença de 10 compostos fenólicos (2 ácidos fenólicos, 3 flavonoides, 2 aloínas e 3 outas antraquinonas), destacando-se a aloenina (flavonoide) como composto maioritário (0,14 μg/100 g mf). No que concerne à bioatividade verificou-se uma maior atividade nas formulações incorporadas com flor de castanheiro com valores de EC50 de 0,11 μg/mL (TBARS) e de IC50 128 μg/mL (OxHLIA - Δt = 60 min). Quanto à estabilidade das formulações desenvolvidas, ambas se mostraram eficazes na inibição do crescimento dos microrganismos, verificando-se uma redução do número de colónias superior à formulação incorporada com benzoato de sódio. Os resultados obtidos neste estudo permitem concluir que os conservantes naturais utilizados não têm influência na composição nutricional e química do nutracêutico estudado e demonstraram ser uma boa alternativa ao benzoato de sódio na conservação deste nutracêutico.
- Ocimum basilicum var. Purpurascens leaves (red rubin basil): A source of bioactive compounds and natural pigments for the food industryPublication . Fernandes, Filipa A.; Pereira, Eliana; Ćirić, Ana; Soković, Marina; Calhelha, Ricardo C.; Barros, Lillian; Ferreira, Isabel C.F.R.Ocimum basilicum var. purpurascens (red rubin basil) is a basil variety rich in anthocyanin compounds, commonly used in the food industry as an aromatic plant. In this study, the nutritional and chemical compositions of red rubin basil leaves were analysed, as well as, the antimicrobial activity and hepatotoxicity of their hydroethanolic extract. Carbohydrates were the main macronutrients present, with glucose being the major free sugar. Quinic acid was the most abundant organic acid, while γ-tocopherol was the highest tocopherol isoform found. α-Linolenic acid was the major fatty acid of the twenty identified compounds. Regarding polyphenols, twenty-six molecules were identified (thirteen non-anthocyanin and thirteen anthocyanin compounds), with rosmarinic acid being the main non-anthocyanin molecule and cyanidin-3-(6,6′-di-p-coumaroyl)-sophoroside-5-glcucoside the most abundant anthocyanin. These compounds could be related to the antimicrobial activity observed in this study. Thus, this variety could be considered a good source of value added molecules for the food industry.
- Ocimum basilicum var. purpurascens: uma fonte de compostos bioativos e pigmentos naturais de interesse para a indústria alimentarPublication . Fernandes, Filipa A.; Ferreira, Isabel C.F.R.; Barros, LillianO reino plantae abrange uma vasta diversidade de espécies e nos últimos anos tem sido alvo de diversos estudos, devido à sua composição em nutrientes e moléculas de elevado interesse, tanto para a indústria alimentar como farmacêutica. Visualmente, a diferenciação das plantas recai sobre a sua cor, particularmente na concentração em pigmentos naturais presente nas folhas, como por exemplo: clorofilas, carotenoides, antocianinas, betalaínas, entre outros. Devido à crescente preocupação dos consumidores sobre os efeitos colaterais associados aos corantes artificiais, a indústria alimentar tem investido na substituição destes aditivos por moléculas corantes naturais, que podem ser obtidas a partir de diversas matrizes vegetais. A variedade Ocimum basilicum var. purpurascens, conhecida popularmente por manjericão vermelho rubi, pertence ao género Ocimum e a sua cor púrpura resulta da elevada concentração em compostos antociânicos. Esta variedade tem manifestado ação terapêutica, nomeadamente, propriedades diuréticas, anti-inflamatórias e antiespasmódicas. Este trabalho teve como objetivo aprofundar os conhecimentos relativamente a esta variedade, através da caracterização de parâmetros físicos (cor), nutricionais (teor em humidade, cinzas, proteínas, gorduras, hidratos de carbono e energia) e químicos (açúcares livres, ácidos orgânicos, tocoferóis e ácidos gordos) das folhas; seguido da avaliação do conteúdo em compostos fenólicos e do potencial bioativo (atividade antioxidante, atividade antimicrobiana e citotoxicidade) do seu extrato hidroetanólico. Foi ainda efetuado a otimização do processo de extração de antocianinas, através de uma técnica de extração assistida por calor (HAE), aplicando o método de análise de superfície de resposta. Ao extrato rico em compostos antociânicos, obtido no final do processo de otimização, foi avaliado o poder corante, através da medição da cor e quantificação dos pigmentos no extrato. Este foi ainda avaliado quanto ao potencial bioativo, através dos ensaios acima referidos. O perfil nutricional foi avaliado utilizando metodologias oficiais de análise de produtos alimentares (AOAC), evidenciando-se os hidratos de carbono, como os macronutrientes presentes em maior quantidade, contrariamente à fração lipídica que surgiu em menor quantidade. A nível químico, a quantificação dos açúcares livres foi feita através de um sistema de HPLC-RI, os ácidos orgânicos por UFLC-DAD, os tocoferóis por HPLC-fluorescência e os ácidos gordos por GC-FID. As amostras revelaram a presença de vários compostos de interesse, nomeadamente quatro moléculas de açúcares livres e sete ácidos orgânicos, destacando-se a glucose e o ácido quínico, respetivamente. Relativamente ao teor em tocoferóis, foram detetadas as isoformas α-, β-, γ- e δ-tocoferol, sendo o γ-tocoferol o mais abundante. No que concerne ao perfil de ácidos gordos, foram identificados vinte compostos, destacando-se o ácido α-linolénico (C18:3n3) como maioritário. A determinação do perfil fenólico foi realizada através de um sistema de HPLC-DAD-ESI/MS, evidenciando a presença de 26 compostos fenólicos, dos quais 13 foram identificados como compostos fenólicos não antociânicos, destacando-se o ácido rosmarínico como composto maioritário e 13 compostos antociânicos, no qual a cianidina-3-(6,6′-di-p-cumaroil)-soforósido-5-glucósido foi o composto mais abundante. Nos ensaios de bioatividade, o potencial antioxidante foi avaliado através de três ensaios in vitro (atividade captadora de radicais DPPH, poder redutor e inibição da peroxidação lipídica medido através da descoloração do β-caroteno), verificando-se resultados promissores no extrato hidroetanólico estudado, sobressaindo no ensaio da atividade captadora de radicais DPPH com os valores de EC50 mais baixos (melhor potencial antioxidante). A atividade antimicrobiana foi analisada através do método de microdiluição em bactérias Gram-positivo e Gram-negativo e em fungos, tendo-se alcançado resultados satisfatórios para a maioria das bactérias e fungos testados. Na avaliação da citotoxicidade, foram usadas várias linhas celulares tumorais (HepG2, NCI-H460, MCF-7 e HeLa) e a uma cultura de células primária não tumoral (PLP2), aplicando o ensaio da sulforrodamina B. Os resultados demonstraram a ausência de capacidade anti-proliferativa em todas as linhas testadas, contudo, também foi evidente a ausência de toxicidade do extrato na cultura de células primárias testada – PLP2. Tendo em conta o procedimento de otimização da extração para a obtenção de um extrato rico em antocianinas, a extração assistida por calor revelou a obtenção de 114,74 ± 0.58 mg de antocianinas por g de extrato, quando se aplicaram as variáveis t= 65,37 ± 3,62 min, T= 85,00 ± 1,17 ºC e S= 62,50 ± 4,24 %. O procedimento e as condições otimizadas neste trabalho triplicaram o teor total de antocianinas obtidas, usando o método convencional, dando origem à importância da otimização de um procedimento de extração. Para além dos aspetos químicos, o extrato ótimo rico em antocianinas foi analisado tendo em conta parâmetros físicos (cor), e os resultados evidenciaram uma melhoria significativa da cor púrpura, comparativamente com as folhas frescas e ao pó liofilizado das folhas secas do manjericão vermelho rubi. Este extrato também foi avaliado quanto às suas propriedades bioativas, sendo que a atividade antioxidante do extrato otimizado revelou um potencial menor ou muito semelhante ao extrato obtido pelo método convencional. No entanto, revelou resultados muito promissores quanto ao efeito citotóxico e antimicrobiano. Assim, Ocimum basilicum var. purpurascens demonstrou ser uma variedade rica em compostos bioativos, que podem ser aplicados na indústria alimentar e farmacêutica de forma a substituir moléculas artificiais, acrescentando valor às matrizes de incorporação.