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Título: Contributo para a caracterização do sistema de lipases em Yarrowia Lipolytica
Autor: Choupina, Altino
Palavras-chave: Lipase
Yarrowia sp.
Activity
Cloning
YILIP1
YILIP3
Issue Date: 2001
Editora: Universidade Técnica de Lisboa
Citação: Choupina, Altino (2001) - Contributo para a caracterização do sistema de lipases em Yarrowia Lipolytica. Lisboa: UTL. Tese de Doutoramento em Biotecnologia
Resumo: De entre as espécies de leveduras, Yarrowia lipolytica é uma das maiores produtoras de proteínas extracelulares (proteases ácidas neutras e alcalinas, fosfatase ácida, ribonucleases e lipases). As lipases (triacilglicerol hidrolases) são enzimas importantes no metabolismo das gorduras, catalizando a ruptura dos triacilgliceróis em ácidos gordos livres e glicerol. Para além da baixa solubilidade dos seus substratos naturais, esta hidrólise é catalizada na interface entre um substrato insolúvel e a fase aquosa na qual a enzima está solubilizada. Este aspecto distingue-as das esterases , as quais catalizam preferencialmente a hidrólise de ésteres solúveis em água. As lipases constituem um grupo ubíquo de enzimas capazes de catalizarem diversas reacções, muitas das quais de interesse industrial ( hidrólise estereo-selectiva, trans-esterificação, etc.). Neste trabalho, descreve-se a clonagem molecular e a caracterização de um gene de Yarrowia lipolytica, que codifica para uma proteína com actividade lipásica, bem como a caracterização fenotípica de outro gene que codifica para uma proteína com o mesmo tipo de actividade. As sequências completas de DNA destes genes codificam para duas proteínas de 486 e 498 aminoácidos . As sequências de DNA deduzidas apresentam homologia com lipases de outros fungos (Candida cylindracea e Geothrichum candidum) possuindo em comum a sequência do sítio de activação interfacial. As lipases de Yarrowia lipolytica possuem sítios potenciais de N-glicosilação e regiões reguladoras de ORE (oleate response element) nos promotores de ambos os genes. Estas proteínas não apresentam um sinal peptídico claro. A interrupção dos genes Y/L/P1 e Y/L/P3 produz uma diminuição da actividade lipásica em meios com azeite comparativamente com a estirpe selvagem.
Arbitragem científica: yes
URI: http://hdl.handle.net/10198/6187
Versão do Editor: http://berg.ist.utl.pt/theses/achoupina-PhD.html
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