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Abstract(s)
De entre as espƩcies de leveduras, Yarrowia lipolytica Ʃ uma das
maiores produtoras de proteĆnas extracelulares (proteases Ć”cidas neutras e
alcalinas, fosfatase Ɣcida, ribonucleases e lipases). As lipases (triacilglicerol
hidrolases) sĆ£o enzimas importantes no metabolismo das gorduras, catalizando
a ruptura dos triacilglicerĆ³is em Ć”cidos gordos livres e glicerol. Para alĆ©m da
baixa solubilidade dos seus substratos naturais, esta hidrĆ³lise Ć© catalizada na
interface entre um substrato insolĆŗvel e a fase aquosa na qual a enzima estĆ”
solubilizada. Este aspecto distingue-as das esterases , as quais catalizam
preferencialmente a hidrĆ³lise de Ć©steres solĆŗveis em Ć”gua. As lipases
constituem um grupo ubĆquo de enzimas capazes de catalizarem diversas
reacƧƵes, muitas das quais de interesse industrial ( hidrĆ³lise estereo-selectiva,
trans-esterificaĆ§Ć£o, etc.).
Neste trabalho, descreve-se a clonagem molecular e a
caracterizaĆ§Ć£o de um gene de Yarrowia lipolytica, que codifica para uma
proteĆna com actividade lipĆ”sica, bem como a caracterizaĆ§Ć£o fenotĆpica de
outro gene que codifica para uma proteĆna com o mesmo tipo de actividade. As
sequĆŖncias completas de DNA destes genes codificam para duas proteĆnas de
486 e 498 aminoĆ”cidos . As sequĆŖncias de DNA deduzidas apresentam
homologia com lipases de outros fungos (Candida cylindracea e Geothrichum
candidum) possuindo em comum a sequĆŖncia do sĆtio de activaĆ§Ć£o interfacial.
As lipases de Yarrowia lipolytica possuem sĆtios potenciais de N-glicosilaĆ§Ć£o e
regiƵes reguladoras de ORE (oleate response element) nos promotores de
ambos os genes. Estas proteĆnas nĆ£o apresentam um sinal peptĆdico claro.
A interrupĆ§Ć£o dos genes Y/L/P1 e Y/L/P3 produz uma diminuiĆ§Ć£o da
actividade lipƔsica em meios com azeite comparativamente com a estirpe
selvagem.
Description
Keywords
Lipase Yarrowia sp. Activity Cloning YILIP1 YILIP3
Citation
Choupina, Altino (2001). Contributo para a caracterizaĆ§Ć£o do sistema de lipases em Yarrowia Lipolytica. Lisboa: UTL. Tese de Doutoramento em Biotecnologia