| Name: | Description: | Size: | Format: | |
|---|---|---|---|---|
| 3 MB | Adobe PDF |
Authors
Advisor(s)
Abstract(s)
This research aimed to develop analytical methodologies for the quality control of
apitoxin, as well as evaluating its biological activities. A spectrophotometer method was
established to estimate the total protein content, equivalent to albumin, in the apitoxin
samples. Its advantage lies in preserving sample integrity. Additionally, electrochemical
methodologies were developed, allowing confirmation that apitoxin lacks antioxidant
activity and implementing quality control measures for four heavy metals (Zn, Cd, Pb,
and Cu).
The antimicrobial activity of the five apitoxin samples revealed bactericidal action against
all tested strains of Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Klebsiella pneumoniae,
except for Pseudomonas aeruginosa strains, which remained unaffected. Among the
samples, Sample 1 exhibited the lowest MIC values (9.2 µg/mL) against Staphylococcus
aureus, meaning that this bacteria was the most sensitive to the negative effects of
apitoxine. The highest MIC (41.8 µg/mL) was observed against a strain of Klebsiella
pneumoniae in the presence of Sample 5, denoting increased resistance to apitoxin.
Portuguese apitoxin demonstrated significant inhibitory effects against various enzymes:
xanthine oxidase (IC50 values ranged between 1.7± 0.4 and 6.3± 0.85 μg/mL), lipase
(IC50 values ranged from 0.05 ± 0.01µg/mL to 0.16 ±0, 0.03 μg/mL), α-amylase (IC50
values between 0.08 ± 0.02 and 0.4 ± 0.12 μg/mL), α-glucosidase (IC50 values between
0.03 ± 0.01 and 0.14 ± 0.01 μg/mL), lipoxygenase (IC50 values in the range of 0.06± 0.01
to 0.25± 0.04 μg /mL), acetylcholinesterase (IC50 values ranged from 0.78 ± 0.2 to 3.75
± 0.2 μg/mL), tyrosinase (IC50 values between 1.6 ± 0.1 to 4.8 ± 0.24 μg/mL), and
hyaluronidase (inhibition percentage between 85±5.4 % and 75.0±3.3%).
In conclusion, apitoxin possesses valuable antimicrobial and enzyme-inhibiting. These
findings suggest that apitoxin could hold potential significance in addressing various
health conditions and diseases, warranting further scientific investigations due to its
potential application in clinical or pharmaceutical settings.
Esta investigação teve como objetivo o desenvolvimento de metodologias analíticas para o controlo de qualidade da apitoxina, bem como a avaliação das suas actividades biológicas. Foi estabelecido um método espetrofotométrico para estimar o teor de proteína total, equivalente à albumina, nas amostras de apitoxina. A sua vantagem reside na preservação da integridade da amostra. Adicionalmente, foram desenvolvidas metodologias electroquímicas que permitiram confirmar a ausência de atividade antioxidante da apitoxina e implementar medidas de controlo de qualidade para quatro metais pesados (Zn, Cd, Pb e Cu). A atividade antimicrobiana das cinco amostras de apitoxina revelou uma ação bactericida contra todas as estirpes testadas de Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Klebsiella pneumoniae, com exceção das estirpes de Pseudomonas aeruginosa, que não foram afectadas. Entre as amostras, a Amostra 1 apresentou os valores mais baixos de CIM (9,2 µg/mL) contra Staphylococcus aureus, o que significa que esta bactéria foi a mais sensível aos efeitos negativos da apitoxina. A CIM mais elevada (41,8 µg/mL) foi observada contra uma estirpe de Klebsiella pneumoniae na presença da Amostra 5, denotando um aumento da resistência à apitoxina. A apitoxina portuguesa demonstrou efeitos inibitórios significativos contra várias enzimas: xantina oxidase (os valores de IC50 variaram entre 1,7± 0,4 e 6,3± 0. 85 μg/mL), lipase (valores de IC50 variaram entre 0,05 ± 0,01µg/mL e 0,16 ±0, 0,03 μg/mL), α- amilase (valores de IC50 entre 0,08 ± 0,02 e 0,4 ± 0,12 μg/mL), α-glucosidase (valores de IC50 entre 0. 03 ± 0,01 e 0,14 ± 0,01 μg/mL), lipoxigenase (valores de IC50 na faixa de 0,06± 0,01 a 0,25± 0,04 μg /mL), acetilcolinesterase (valores de IC50 variaram de 0,78 ± 0. 2 a 3,75 ± 0,2 μg/mL), tirosinase (valores de IC50 entre 1,6 ± 0,1 a 4,8 ± 0,24 μg/mL) e hialuronidase (percentagem de inibição entre 85±5,4% e 75,0±3,3%). Em conclusão, a apitoxina possui um valioso efeito antimicrobiano e inibidor de enzimas. Estes resultados sugerem que a apitoxina pode ter um significado potencial na abordagem de várias condições de saúde e doenças, justificando mais investigações científicas devido à sua potencial aplicação em contextos clínicos ou farmacêuticos.
Esta investigação teve como objetivo o desenvolvimento de metodologias analíticas para o controlo de qualidade da apitoxina, bem como a avaliação das suas actividades biológicas. Foi estabelecido um método espetrofotométrico para estimar o teor de proteína total, equivalente à albumina, nas amostras de apitoxina. A sua vantagem reside na preservação da integridade da amostra. Adicionalmente, foram desenvolvidas metodologias electroquímicas que permitiram confirmar a ausência de atividade antioxidante da apitoxina e implementar medidas de controlo de qualidade para quatro metais pesados (Zn, Cd, Pb e Cu). A atividade antimicrobiana das cinco amostras de apitoxina revelou uma ação bactericida contra todas as estirpes testadas de Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Klebsiella pneumoniae, com exceção das estirpes de Pseudomonas aeruginosa, que não foram afectadas. Entre as amostras, a Amostra 1 apresentou os valores mais baixos de CIM (9,2 µg/mL) contra Staphylococcus aureus, o que significa que esta bactéria foi a mais sensível aos efeitos negativos da apitoxina. A CIM mais elevada (41,8 µg/mL) foi observada contra uma estirpe de Klebsiella pneumoniae na presença da Amostra 5, denotando um aumento da resistência à apitoxina. A apitoxina portuguesa demonstrou efeitos inibitórios significativos contra várias enzimas: xantina oxidase (os valores de IC50 variaram entre 1,7± 0,4 e 6,3± 0. 85 μg/mL), lipase (valores de IC50 variaram entre 0,05 ± 0,01µg/mL e 0,16 ±0, 0,03 μg/mL), α- amilase (valores de IC50 entre 0,08 ± 0,02 e 0,4 ± 0,12 μg/mL), α-glucosidase (valores de IC50 entre 0. 03 ± 0,01 e 0,14 ± 0,01 μg/mL), lipoxigenase (valores de IC50 na faixa de 0,06± 0,01 a 0,25± 0,04 μg /mL), acetilcolinesterase (valores de IC50 variaram de 0,78 ± 0. 2 a 3,75 ± 0,2 μg/mL), tirosinase (valores de IC50 entre 1,6 ± 0,1 a 4,8 ± 0,24 μg/mL) e hialuronidase (percentagem de inibição entre 85±5,4% e 75,0±3,3%). Em conclusão, a apitoxina possui um valioso efeito antimicrobiano e inibidor de enzimas. Estes resultados sugerem que a apitoxina pode ter um significado potencial na abordagem de várias condições de saúde e doenças, justificando mais investigações científicas devido à sua potencial aplicação em contextos clínicos ou farmacêuticos.
Description
Keywords
Bee venom Control of apitoxin