Browsing by Author "Pereira, Eric Carvalho"
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- Arbutus unedo L. leaves as source of phytochemicals with bioactive propertiesPublication . Malheiro, Ricardo; Sá, Olga; Pereira, Eric Carvalho; Aguiar, Cristina; Baptista, Paula; Pereira, J.A.In recent years the strawberry tree (Arbutus unedo L.) is being gradually replaced by other species with higher economic value. With the ultimate goal of selecting superior genotypes, the present work was initiated to study the antioxidant and antimicrobial activities, and total phenolic content in 19 different genotypes of A. unedo leaves from the Trás-os-Montes region of Portugal. The genotype Braganc¸ a 1 contains higher total phenolic content (215.0 mg GAE/gextract) whereas the Vila Boa 4 genotype shows lower total phenolic content (148.0 mg GAE/gextract). In both methods tested to evaluate the antioxidant activity, Vila Verde and Donai displayed the highest antioxidant capacity (EC50 values of 0.088 and 0.090 mg/mL, respectively, for DPPH; EC50 values of 0.233 and 0.245 mg/mL, respectively, for reducing power assay) while Vila Boa 2 reported the lowest antioxidant potential (EC50 values of 0.142 and 0.378 mg/mL, respectively, in DPPH and reducing power methods). Linear negative correlations were established between the total phenol contents and the EC50 values for both of the antioxidant activity methods tested. Preliminary assays for antimicrobial potential showed that extracts from A. unedo leaves display antibacterial activity, with MIC values of 1 and 5 mg/mL for some Grampositive and Gram-negative bacteria, respectively. Taken together, the results suggest that A. unedo leaves are a potential source of natural compounds with valuable bioactive properties that could be explored by the pharmaceutical, chemical and food industries.
- Cancro do Castanheiro em Trás-os-Montes (Portugal): Incidência atual e estudo da estrutura populacional de Cryphonectria parasitica para a introdução da luta Biológica por HipovirulênciaPublication . Gouveia, Maria Eugénia; Pereira, Eric Carvalho; Araújo, Arsénio; Coelho, Valentim; Castro, João Paulo; Bragança, Helena; Martins, LuísO castanheiro europeu (Castanea sativa Mill.) é a árvore central de um sistema agroflorestal extensivo e multifuncional muito característico das montanhas do nordeste de Portugal. A introdução do fungo Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr que provoca no castanheiro cancros nos tecidos corticais é desde a sua introdução, em 1989, a principal causa de morte do castanheiro. Não existindo meios de luta eficazes a remoção dos cancros é utilizada para reduzir o inóculo do parasita. O método evidenciou pouca eficácia e a doença está presente em todas as regiões de castanheiro. A Hipovirulência, mediada pela presença do hipovírus CHV1, é um método muito eficaz para o tratamento dos cancros e recuperação dos castanheiros. Foi objetivo deste trabalho avaliar a estrutura da população de C. parasitica para introduzir a Hipovirulência. Em 3 freguesias, onde a doença está presente desde a sua introdução, foi estudada a estrutura populacional do fungo parasita. Numa malha geográfica de 500x500m, 70 pontos de amostragem e 1331 castanheiros foram estudados. A análise geoestatística revelou focos de grande intensidade da doença que variaram de 54,75 a 73,33%. Foram identificados 5 vc types. EU-11 é o grupo dominante com 85,55%, seguido do EU01 (5,34%), EU66 (4,58%) e EU12 (2,90%), considerados novas introduções do parasita. O idiomorfo MAT-1 e MAT-2 estão presentes nas populações estudadas, sendo o MAT-2 dominante. A proporção 1:1 identificada, num dos locais, sugere multiplicação sexuada do fungo. A ainda baixa diversidade vc type na população de C. parasitica aconselha a introdução da Hipovirulência como meio de luta preferencial contra o Cancro do Castanheiro em Portugal.
- Caracterização da estrutura populacional de Cryphonectria parasitica para aplicação da luta biológica por hipovirulência: um caso de estudo na Serra da PadrelaPublication . Pereira, Eric Carvalho; Prospero, Simone; Araújo, Arsénio; Coelho, Valentim; Rigling, Daniel; Gouveia, Maria EugéniaO castanheiro europeu (Castanea sativa Mill) é a principal espécie do sistema agroflorestal nas regiões montanhosas de Portugal. O castanheiro é atualmente afetado por vários agentes patogénicos agressivos, destacando-se o fungo Cryphonectria parasitica, que causa o Cancro do Castanheiro, que provoca a morte da árvore. A Hipovirulência, associada à presença de Cryphonectria hypovirus 1 no fungo fitoparasita, é um método específico e eficiente no controlo biológico do Cancro do Castanheiro. Para uma aplicação eficaz deste método no campo é necessário conhecer as características das estirpes agressivas de C. parasitica presentes no campo. Na Serra da Padrela foi selecionado um souto para realizar este estudo. Foi efetuado uma caracterização dos cancros ativos, e posteriormente o seu tratamento por Hipovirulência. Dos isolados obtidos dos cancros, 99% eram agressivos, sendo identificados 3 isolados como hipovirulentos. Todos foram classificados como vc-type EU-11, estando em maior abundância o mating-type 2, numa proporção de 2:1 comparativamente ao mating-type 1. Os cancros agressivos foram tratados com as estirpes hipovirulentas compatíveis tendo-se observado ao fim de 1 ano uma recuperação das árvores afetadas tendo-se confirmado a presença das estirpes hipovirulentas em cancro anteriormente agressivos.
- Controlo biológico do cancro do castanheiro. Deteção, identificação e caracterização do Hypovirus - CHV1Publication . Pereira, Eric Carvalho; Rigling, Daniel; Prospero, Simone; Gouveia, Maria EugéniaO cancro do castanheiro é provocado pelo fungo Cryphonectria parasitica é considerado a principal causa do declínio dos castanheiros na Europa. C. parasitica é um ascomiceta (Diaporthales) nativo do continente asiático. A infeção do castanheiro manifesta-se pelo aparecimento de necroses extensas na casca dos ramos e troncos, que resulta na morte dos castanheiros. A hipovirulência é um método seletivo de controlo biológico do Cancro do Castanheiro, trata-se de uma infeção do fungo C. parasitica com Cryphonectria hypovirus 1 (CHV1), um vírus de dsRNA não encapsulado do género Hypovirus. O controlo biológico com estirpes hipovirulentas é considerado um método eficaz no controlo da doença e promove a recuperação dos castanheiros. A aplicação necessita da produção em laboratório de estirpes hipovirulentas compatíveis com a estirpe virulenta presente no campo e a sua introdução na margem de cancros ativos. Neste estudo pretendeu-se detetar, identificar e caracterizar o hipovirus CHV1 com potencial para integrar programas de controlo biológico do Cancro do castanheiro em Portugal. Com a utilização de métodos moleculares foram identificados e caracterizados 11 hipovirus em isolados brancos de C. parasitica obtidos em cancros no nordeste de Portugal.
- Determination of amatoxins and phallotoxins in Amanita phalloides mushrooms from northeastern Portugal by HPLC-DAD-MSPublication . Garcia, Juliana; Oliveira, Ana Paula Leandro; Pinho, P. Guedes de; Freitas, Victor; Carvalho, Alexandra T.P.; Baptista, Paula; Pereira, Eric Carvalho; Bastos, Maria de Lourdes; Carvalho, FélixAmanita phalloides is a toxic mushroom responsible for the majority of deaths occurring after mushrooms ingestion, mainly due to amatoxins. In the present study the contents and distribution of the major amatoxins and phallotoxins in different tissues of A. phalloides from two different sites of Portugal were analyzed by liquid chromatography (LC) coupled to diode array (DAD) and mass spectrometry (MS) detection. The main toxins were separated by LC and its chemical structures confirmed by MS. a-Amanitin contents in caps, stipe and volva tissues were quantified by RP-HPLC. The results show that caps have the highest content of amatoxins, whereas the volva was richest in phallotoxins. Moreover variability in the toxins composition from different geographic sites was also observed. This study provides for the first time the content of toxins in A. phalloides from Portugal.
- Dispersión natural de la hipovirulencia en Cryphonectria parasitica. Un caso de estudio, Sergude – Minho – PortugalPublication . Ibáñez, Isabel; Pereira, Eric Carvalho; Moura, Luísa; Castro, João Paulo; Gouveia, Maria EugéniaEl castaño (Castanea sativa) es una especie de gran importancia económica y social en la región del Norte de Portugal. Uno de los mayores obstáculos en el aumento de la producción de castaña está relacionada con la presencia de factores bióticos como la antigua y conocida enfermedad de la Tinta y más recientemente con el chancro que provoca elevada mortalidad en los castaños. No hay sustancias químicas capaces de bloquear el desarrollo del chancro del castaño y todos los medios de lucha cultural mostraron baja eficacia. La hipovirulencia es el medio de lucha biológica y la manera más ventajosa para parar la enfermedad en Europa. El método mostro una elevada capacidad de cura en los chancros y la recuperación completa de los castaños atacados. El mecanismo molecular de hipovirulencia está asociado a la presencia en el hongo parasítico del virus dsRNA denominado Hypovirus (CHV). En Sergude (Minho) en una parcela con todos los árboles atacados por C. parasitica se verifico en un periodo de 3 – 4 años la remisión natural de los chancros llevando a la recuperación de los árboles enfermos. Conocer los mecanismos implicados en la expresión de la hipovirulencia y los factores asociados a su dispersión natural fue el objeto de este trabajo. Se estudió la estructura poblacional de C. parasitica presente en la parcela así como la micoflora epifítica y endofítica asociada.
- Effect of competitive interactions between ectomycorrhizal and saprotrophic fungi on Castanea sativa performancePublication . Pereira, Eric Carvalho; Coelho, Valentim; Tavares, Rui Manuel; Lino-Neto, Teresa; Baptista, PaulaIn Northeast of Portugal, the macrofungal community associated to chestnut tree (Castanea sativa Mill.) is rich and diversified. Among fungal species, the ectomycorrhizal Pisolithus tinctorius and the saprotroph Hypholoma fasciculare are common in this habitat. The aim of the present work was to assess the effect of the interaction between both fungi on growth, nutritional status, and physiology of C. sativa seedlings. In pot experiments, C. sativa seedlings were inoculated with P. tinctorius and H. fasciculare individually or in combination. Inoculation with P. tinctorius stimulated the plant growth and resulted in increased foliar-N, foliar-P, and photosynthetic pigment contents. These effects were suppressed when H. fasciculare was simultaneously applied with P. tinctorius. This result could be related to the inhibition of ectomycorrhizal fungus root colonization as a result of antagonism or to the competition for nutrient sources. If chestnut seedlings have been previously inoculated with P. tinctorius, the subsequent inoculation of H. fasciculare 30 days later did not affect root colonization, and mycorrhization benefits were observed. This work confirms an antagonistic interaction between ectomycorrhizal and saprotrophic fungi with consequences on the ectomycorrhizal host physiology. Although P. tinctorius is effective in promoting growth of host trees by establishing mycorrhizae, in the presence of other fungi, it may not always be able to interact with host roots due to an inability to compete with certain fungi.
- Eficácia do tratamento do Cancro do Castanheiro em ensaios de inoculação com estirpes hipovirulentas de Cryphonectriaparasitica(CHV1) em Trás-os-Montes (Portugal)Publication . Pereira, Eric Carvalho; Araújo, Arsénio; Prospero, Simone; Coelho, Valentim; Rigling, Daniel; Gouveia, Maria EugéniaO castanheiro europeu (Castanea sativa Mill) é a principal espécie do sistema agroflorestal nas regiões montanhosas de Portugal. O castanheiro é atualmente afetado por vários agentes patogénicos agressivos, destacando-se o fungo Cryphonectria parasitica, que causa o Cancro do Castanheiro, que provoca a morte da árvore. A Hipovirulência, associada à presença de Cryphonectria hypovirus 1 no fungo fitoparasita, é um método específico e eficiente no controlo biológico do Cancro do Castanheiro. Para uma aplicação eficaz deste método no campo é necessário conhecer as características das estirpes agressivas de C. parasitica presentes no campo. Na Serra da Padrela foi selecionado um souto para realizar este estudo. Foi efetuado uma caracterização dos cancros ativos, e posteriormente o seu tratamento por Hipovirulência. Dos isolados obtidos dos cancros, 99% eram agressivos, sendo identificados 3 isolados como hipovirulentos. Todos foram classificados como vc-type EU-11, estando em maior abundância o mating-type 2, numa proporção de 2:1 comparativamente ao mating-type 1. Os cancros agressivos foram tratados com as estirpes hipovirulentas compatíveis tendo-se observado ao fim de 1 ano uma recuperação das árvores afetadas tendo-se confirmado a presença das estirpes hipovirulentas em cancro anteriormente agressivos.
- Entomopathogenic fungi associated with the main insect pest in the Northeast of Portugal: preliminary resultsPublication . Baptista, Paula; Pereira, Eric Carvalho; Nogueira, Liliana; Bento, Albino; Santiago-Álvarez, C.; Quesada-Moraga, Enrique; Pereira, J.A.Due to the problems caused by the use of chemical insecticides for humans and environment alternative pest control methods are an important topic of research. The use of microbial insecticides especially fungal agents are an attractive and promising alternative for biological control of insect pests. The aim of this work was to identify naturally occurring entomophatogenic fungi on the olive moth, Prays oleae Bern., in the northeast of Portugal, as first step to select biological control agent again this olive pest. The experimental work was carried out during 2007 in the three generation of the insect (phyllophagous, anthophagous and carpophagous generation). In each generation P. oleae larvae and pupae were collected in different groves and were put in glass vials in a climatic chamber with a photoperiod of 12h light:12h dark, 22ºC (light): 16ºC (dark) and 60% relative humidity, until emergency of the adults. From dead larvae, fungi were isolated on PDA plates and incubated at room temperature. Pure cultures were morphological and molecularly identified based on the ITS region of the rDNA. From the identified species Beauveria bassiana Vuill. and Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc. were the most promising being B. bassiana the most abundant one.
- Estudo da interacção do fungo saprófita Hypholoma fasciculare com microrganismos filamentosos e seu efeito no crescimento de plantas de castanheiroPublication . Pereira, Eric Carvalho; Baptista, Paula; Neto, Maria Teresa LinoHypholoma fasciculare é um fungo saprófita-lenhícola muito comum nos povoamentos de Castanea sativa na região do nordeste transmontano. Nos últimos anos, esta espécie tem sido explorada como agente de controlo biológico, por ser muito combativa contra espécies patogénicas. O presente trabalho tem como objectivo geral avaliar o potencial do H. fasciculare como agente de controlo biológico; e o efeito da sua aplicação nos fungos ectomicorrízicos bem como nas plantas de castanheiro e no processo de micorrização pelo Pisolithus tinctorius. A avaliação do potencial do H. fasciculare como agente de controlo biológico, foi efectuada em condições in vitro pelo método da cultura dupla. O fungo H. fasciculare inibiu significativamente o crescimento dos patogéneos Armillaria mellea e Phytophthora cambivora, e dos fungos micorrízicos Suillus luteus e Pisolithus tinctorius. Os mecanismos adoptados pelo H. fasciculare foram “antagonismo e agonismo à distância”, respectivamente para as espécies patogénicas e micorrízicas. Neste processo parecem intervir enzimas líticas, como a amilase, celulase, lacase e lipase, produzidas pelo H. fasciculare. Observaram-se ainda alterações morfológicas no H. fasciculare possivelmente com o intuito de se tornar mais resistente à invasão da espécie interactuante e/ou mais invasivo. Pelo contrário, nas co-culturas com Amanita gemmata e Colletotrichum acutatum o crescimento de H. fasciculare foi inibido; e com P. cinnamomi e S. bovinus não se observaram diferenças de crescimento para as espécies interactuantes. O efeito da aplicação de H. fasciculare nas plantas de castanheiro e no processo de micorrização pelo P. tinctorius foi avaliada em condições de estufa. As plantas inoculadas com P. tinctorius apresentavam um maior crescimento e níveis foliares de azoto, fósforo, clorofilas (a, b e total) e carotenóides face às plantas não inoculadas. O efeito positivo da micorrização foi contudo suprimido pelo fungo H. fasciculare quando aplicado simultaneamente com P. tinctorius. Este resultado poderá estar relacionado com a inibição da micorrização das raízes pelo H. fasciculare e/ou pela competição entre o P. tinctorius e o H. fasciculare por nutrientes, nomeadamente azoto. O efeito deletério de H. fasciculare não se verificou quando aplicado nas plantas isoladamente ou 30 dias depois da inoculação com P. tinctorius. Os resultados obtidos evidenciam xiv uma interacção antagónica entre fungos ectomicorrízicos e saprófitas com repercussões ao nível do crescimento e fisiologia da planta.