Browsing by Author "Obeidat, Wisam"
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- Estrutura populacional e estado de conservação das subespécies de Apis mellifera no Oriente Próximo e MédioPublication . Yadró Garcia, Carlos A.; Henriques, Dora; Honrado, Mónica; Amaral, Joana S.; Eissa, Asmaa Anwar; Haddad, Nizar; Obeidat, Wisam; Arruda, James; Lamghari, Fouad; Cilia, Giovanni; Martín-Hernández, Raquel; Nanetti, Antonio; Pinto, M. AliceA abelha melífera, Apis mellifera, é composta por 31 subespécies que se encontram distribuídas na Ásia, África e Europa. O objetivo deste trabalho é desvendar a estrutura populacional e verificar o estado de conservação de três subespécies do Médio Oriente, as quais têm sido pouco estudadas. Para isso, foi extraído o DNA a partir de tóraxes inteiros de machos de 329 amostras de A. m. lamarckii (Egito, 68 amostras), A. m. syriaca (Jordânia, 238 amostras) e A. m. jemenitica (Omã e Emirados Árabes Unidos, 23 amostras). Foram adicionadas 21 amostras de A. m. ligustica, que é uma subespécie amplamente utilizada pelos apicultores no mundo inteiro e por isso fonte de introgressão genética. O genoma completo das 329 amostras foi sequenciado na plataforma Illumina NovaSeq 600 tendo como objetivo uma cobertura de 20X. Os 329 genomas foram mapeados usando o genoma de referência Amel_HAv3.1 e foi implementada uma pipeline que garante a qualidade dos dados. No final, obteve-se um total de 4.030.485 de SNPs que foram usados na reconstrução da estrutura populacional com o ADMIXTURE e PCA. As amostras egípcias mostraram que apesar de terem alguma introgressão de A. m. ligustica, essa não é relevante e é variável (Q-values entre 1E-05 e 0.44), com a maior parte (97%) das amostras apresentando um valor médio de 0.07 ± 0.06 (Q-values, meia ± DP). A. m. syriaca apresenta uma estrutura complexa, tendo sido observados dois grupos distintos pelo PCA e três pelo ADMIXTURE. Relativamente seu ao estado de conservação, foram detetados 76 indivíduos com uma proporção considerável (Q-values entre 0.15 e 0.47) de introgressão com A. m. ligustica. No caso de A. m. jemenitica, foram observados dois cenários diferentes. Em Omã, todas as amostras estudadas mostraram ser puras. Por outro lado, apenas sete amostras dos Emirados Árabes Unidos foram classificadas como tal, enquanto as restantes mostraram proporções de introgressão semelhantes às do Egito. Estes resultados evidenciam o estado precário de integridade genética que estas subespécies apresentam nos locais estudados. No entanto, a existência de indivíduos que podem ser considerados puros para suas respetivas subespécies pode servir como ponto de partida para o desenvolvimento de planos de conservação.
- Exploiting the mitogenomes of apis mellifera subspecies to develop an authentication tool to verify the entomological origin of mediterranean honeysPublication . Honrado, Mónica; Henriques, Dora; Santos, Joana; Yadró Garcia, Carlos A.; Martín-Hernández, Raquel; Nanetti, Antonio; González, Amelia Virginia; Al Shagour, Banan; Hosri, Chadi; Farrugia, Dylan; Giovanni, Cilia; Zammit Mangion, Marion; Muz, Mustafa Necati; Haddad, Nizar; Galea, Thomas; Haider, Yamina; Obeidat, Wisam; Aglagane, Abdessamad; Arab, Alireza; Varnava, Andri; Eissa, Asmaa Anwar; Muz, Dilek; Hatjina, Fani; Lamghari, Fouad; Arruda, James; Caristos Caristos, Leonidas; Pinto, M. Alice; Amaral, Joana S.Honey is highly susceptible to adulteration. Currently, the assessment of its geographical origin remains one of the most difficult tasks, which is typically performed by melyssopalynology. Recently, the attention has shifted towards indirect approaches such as the entomological origin based on geographical distribution patterns of honey bee subspecies. Although queens’ trade has impacted the natural subspecies distribution, honeys produced with autochthonous bees or bearing a Protected Designation of Origin specifying the producing honey bee subspecies, offer a unique avenue for authentication. In the MEDIBEES project, we aim to develop a DNA-metabarcoding approach to authenticate honey's entomological origin focusing on mitochondrial lineages A, M, C, and O. To achieve this goal, the DNA from 1251 honey bees representing 16 subspecies (A.m. sahariensis, A.m. intermissa, A.m. siciliana, A.m. ruttneri, A.m. iberiensis, A.m. ligustica, A.m. macedonica, A.m. adami, A.m. cecropia, A.m. cypria, A.m. caucasia, A.m. meda, A.m. anatoliaca, A.m. syriaca, A.m. jemenitica, A.m. lamarcki) was extracted and the whole genome sequenced. From those, 740 mitogenomes were assembled using the MitoZ software. The quality of the assembled mitogenome was assessed by aligning all the sequences using MEGA and 348 samples were deleted. Finally, a phylogenetic analysis was conducted to eliminate non-local subspecies, resulting in a total of 326 mitogenomes. This dataset was used for calculating the fixation index (FST) pairwise values, and a sliding window of 400bp was used to identify single nucleotide polymorphisms that effectively differentiate (FST>0.98) the four lineages, enabling the identification of promising regions for primer design. In this study, three regions were identified that discriminate the four maternal lineages while showing an appropriate length for metabarcoding, namely in the COI, ND1 gene, and CYTB genes.
- Genomic insights into middle eastern honey bee subspecies: population structure and genetic integrityPublication . Henriques, Dora; Yadró Garcia, Carlos A.; Honrado, Mónica; Amaral, Joana S.; Muz, Mustafa Necati; Muz, Dilek; Haddad, Nizar; Al Shagour, Banan; Obeidat, Wisam; Hosri, Chadi; Arab, Alireza; Arruda, James; Lamghari, Fouad; Rufino, José; Martín-Hernández, Raquel; Nanetti, Antonio; Pinto, M. AliceThe genetic patterns of Middle Eastern A. mellifera subspecies have been understudied, hindering a comprehensive understanding of honey bee evolutionary history. Here, we studied the genetic integrity of five Middle Eastern subspecies across a broad geographical range: Turkey (A. m. anatoliaca, N=97; A. m. caucasia, N=75; A. m. syriaca, N=18), Jordan and Lebanon (A. m. syriaca, N=238 and N=29), Iran (A. m. meda, N=75), Oman, and the UAE (A. m. jemenitica, N=13 and N=10). ADMIXTURE and PCA analyses were conducted on SNPs detected from whole-genomes. Our findings reveal concerning conservation statuses for many populations/subspecies. In A. m. caucasia and A. m. anatoliaca, only 10 and 28 samples, respectively, were pure (introgression < 90%). In the A. m. caucasia range, 60 samples were hybrids of A. m. caucasia, A. m. syriaca, and A. m. ligustica. In the A. m. anatoliaca range, 69 samples showed high hybridization degrees with A. m. syriaca, and A. m. caucasia. Only six samples in the Turkish range of the A. m. syriaca range were identified as pure, while the rest were also hybrids. All samples from Jordan and Lebanon showed variable A. m. ligustica introgression. In Iran, 23 samples were classified as pure A. m. meda. The rest showed introgression primarily due to A. m. ligustica and A. m. caucasia. In the UAE, two main groups were identified: the first comprised hybrids of A. m. jemenitica, A. m. lamarckii and A. m. ligustica, and the second group mainly consisted of hybrids of A. m. lamarckii and A. m. ligustica. Oman stands out as the sole location where all samples were identified as pure A. m. jemenitica. This study indicates widespread hybridization across various regions and underscores the urgent need for targeted conservation efforts for Middle Eastern subspecies.