Publication
Comparação de métodos de extração de DNA para a detecção de resíduos de avelã em chocolate como potencial alergéneo
| dc.contributor.author | Melo, Vítor S. | |
| dc.contributor.author | Santos, Cristina G. | |
| dc.contributor.author | Costa, Joana | |
| dc.contributor.author | Mafra, Isabel | |
| dc.contributor.author | Amaral, Joana S. | |
| dc.contributor.author | Estevinho, Leticia M. | |
| dc.contributor.author | Oliveira, Beatriz | |
| dc.date.accessioned | 2014-08-11T15:32:52Z | |
| dc.date.available | 2014-08-11T15:32:52Z | |
| dc.date.issued | 2011 | |
| dc.description.abstract | As reacções alérgicas causadas pela ingestão de alimentos constituem um problema emergente na gestão da segurança alimentar. De modo a salvaguardar a saúde dos consumidores, os ingredientes que possam causar reacções alérgicas devem ser devidamente rotulados e a contaminação cruzada deve ser evitada. Entre as diversas reacções provocadas pelos alimentos que contêm produtos de casca rija (chocolate, bolachas e bolos), as provocadas pelos alimentos que contêm avelã são consideradas das mais perigosas devido à sua frequência e gravidade [!]. Recentemente, a detecção de resíduos de alergénios recorrendo a técnicas baseadas no DNA, em particular, na reacção em cadeia da polimerase (PCR) têm-se mostrado alternativas promissoras aos métodos imunológicos correntes. Contudo, matrizes complexas corno o chocolate, contêm polissacarídeos e polifenóis que inibem a PCR. Actualmente existem diversos kits comerciais que permitem a extracção de DNA, mas apenas um número Limitado permite a obtenção de DNA em quantidade e pureza adequadas para PCR. Pretendeu-se com este trabalho comparar diversos métodos de extracção de DNA (CTAB, Wizard, Nucleospin e Wizard Magnetic) com e sem a adição de polivinilpirrolidona (PVP) e/ou RNAse. Para tal, prepararam-se misturas de referência contendo quantidades conhecidas de avelã em chocolate (0.01-10%) e procedeu-se à extracção. O rendimento e pureza dos extractos foram avaliados por espectrofotornetria. Para a detecção de avelã foram usados primers específicos para o gene hspl para a obtenção de fragmentos de 100 bp [2]. Os resultados mostraram que os métodos Wizard com RNAse e CTAB, ambos com a adição de PVP 1%, permitiram níveis de amplificação semelhantes até extractos com 0,05% de avelã, com rendimentos mais elevados com o método Wizard (-100 ng/μL). Os métodos Nucleospin Food kit com RNAse e Wizard Magnetic apresentaram rendimentos semelhantes ao método Wizard, tendo também permitido a detecção de 0,05% de avelã, no entanto evidenciaram pouca reprodutibilidade na amplificação. | por |
| dc.identifier.citation | Melo, Vítor S.; Santos, Cristina G.; Costa, Joana; Mafra, Isabel; Amaral, J.S.; Estevinho, Leticia M.; Oliveira, M.B.P.P. (2011). Comparação de métodos de extração de DNA para a detecção de resíduos de avelã em chocolate como potencial alergéneo. In XXII Encontro Nacional da Sociedade Portuguesa de Química. Braga | por |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10198/10084 | |
| dc.language.iso | por | por |
| dc.peerreviewed | yes | por |
| dc.relation | ALERGÉNIOS NATURAIS DOS ALIMENTOS: NOVAS ABORDAGENS PARA A SUA DETECÇÃO, CARACTERIZAÇÃO E BIODISPONI-BILIDADE IN VITRO | |
| dc.title | Comparação de métodos de extração de DNA para a detecção de resíduos de avelã em chocolate como potencial alergéneo | por |
| dc.type | conference object | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| oaire.awardTitle | ALERGÉNIOS NATURAIS DOS ALIMENTOS: NOVAS ABORDAGENS PARA A SUA DETECÇÃO, CARACTERIZAÇÃO E BIODISPONI-BILIDADE IN VITRO | |
| oaire.awardURI | info:eu-repo/grantAgreement/FCT//SFRH%2FBD%2F64523%2F2009/PT | |
| oaire.citation.conferencePlace | Braga, Portugal. | por |
| oaire.citation.title | XXII Encontro Nacional da Sociedade Portuguesa de Química | por |
| person.familyName | Amaral | |
| person.familyName | Estevinho | |
| person.givenName | Joana S. | |
| person.givenName | Letícia M. | |
| person.identifier.ciencia-id | 5319-7DE8-BEDA | |
| person.identifier.ciencia-id | BA14-09D6-A406 | |
| person.identifier.orcid | 0000-0002-3648-7303 | |
| person.identifier.orcid | 0000-0002-9249-1948 | |
| person.identifier.scopus-author-id | 6506577664 | |
| project.funder.identifier | http://doi.org/10.13039/501100001871 | |
| project.funder.name | Fundação para a Ciência e a Tecnologia | |
| rcaap.rights | openAccess | por |
| rcaap.type | conferenceObject | por |
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