ALERGÉNIOS NATURAIS DOS ALIMENTOS: NOVAS ABORDAGENS PARA A SUA DETECÇÃO, CARACTERIZAÇÃO E BIODISPONI-BILIDADE IN VITRO

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Comparação de métodos de extração de DNA para a detecção de resíduos de avelã em chocolate como potencial alergéneo

Publication . Melo, Vítor S.; Santos, Cristina G.; Costa, Joana; Mafra, Isabel; Amaral, Joana S.; Estevinho, Leticia M.; Oliveira, Beatriz

As reacções alérgicas causadas pela ingestão de alimentos constituem um problema emergente na gestão da segurança alimentar. De modo a salvaguardar a saúde dos consumidores, os ingredientes que possam causar reacções alérgicas devem ser devidamente rotulados e a contaminação cruzada deve ser evitada. Entre as diversas reacções provocadas pelos alimentos que contêm produtos de casca rija (chocolate, bolachas e bolos), as provocadas pelos alimentos que contêm avelã são consideradas das mais perigosas devido à sua frequência e gravidade [!]. Recentemente, a detecção de resíduos de alergénios recorrendo a técnicas baseadas no DNA, em particular, na reacção em cadeia da polimerase (PCR) têm-se mostrado alternativas promissoras aos métodos imunológicos correntes. Contudo, matrizes complexas corno o chocolate, contêm polissacarídeos e polifenóis que inibem a PCR. Actualmente existem diversos kits comerciais que permitem a extracção de DNA, mas apenas um número Limitado permite a obtenção de DNA em quantidade e pureza adequadas para PCR. Pretendeu-se com este trabalho comparar diversos métodos de extracção de DNA (CTAB, Wizard, Nucleospin e Wizard Magnetic) com e sem a adição de polivinilpirrolidona (PVP) e/ou RNAse. Para tal, prepararam-se misturas de referência contendo quantidades conhecidas de avelã em chocolate (0.01-10%) e procedeu-se à extracção. O rendimento e pureza dos extractos foram avaliados por espectrofotornetria. Para a detecção de avelã foram usados primers específicos para o gene hspl para a obtenção de fragmentos de 100 bp [2]. Os resultados mostraram que os métodos Wizard com RNAse e CTAB, ambos com a adição de PVP 1%, permitiram níveis de amplificação semelhantes até extractos com 0,05% de avelã, com rendimentos mais elevados com o método Wizard (-100 ng/μL). Os métodos Nucleospin Food kit com RNAse e Wizard Magnetic apresentaram rendimentos semelhantes ao método Wizard, tendo também permitido a detecção de 0,05% de avelã, no entanto evidenciaram pouca reprodutibilidade na amplificação.

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Comparision of DNA extraction methods to detect trace amounts of tree nut allergens in chocolates

Publication . Costa, Joana; Melo, Vítor S.; Santos, Cristina G.; Mafra, Isabel; Amaral, Joana S.; Estevinho, Leticia M.; Oliveira, Beatriz

Food-induced allergies represent an emerging problem of food safety. Thus, to safeguard the health of sensitised consumers, food ingredients that may cause allergic reactions should be properly labelled and possible cross-contamination should be avoided. Among food allergies, abnormal immunological responses towards tree nuts are pointed as a frequent source of serious atypical reactions, in which the hypersensitivities associated to almond and hazelnut ingestion are considered dangerous due to their incidence and severity [1 ,2]. Although immunological methods have been used for the direct detection of the almond and hazelnut allergens with high sensitivity, these assays are susceptible to cross-reactivity with other tree nuts

2011Conference object

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Refining of roundup ready R soya bean oil: effect on the fatty acid, phytosterol and tocopherol profiles

Publication . Costa, Joana; Amaral, Joana S.; Mafra, Isabel; Oliveira, Beatriz

In this study, genetically modified (GM) soya bean seeds with the event known as Roundup Ready1 were used for the production of soya bean oil and their fatty acid, phytosterol and tocopherol composition was characterised. Since these compounds can be partially lost during refining, this study also aimed at evaluating the compositional changes along the GM soya bean oil extraction and refining processes carried out industrially. During the refining process of crude soya bean oil, neutralisation was responsible for the major losses on phytosterols (15%). The greatest reduction of tocopherols was also caused by the neutralisation step (20%), while the deodorisation step caused minor losses (9%). Along the refining process, the decreases of total phytosterols and total tocopherols were 20 and 30%, respectively, which are lower than the losses reported in other studies, reflecting the industrial improvements in preserving beneficial health compounds in the refined oil. The results showed that the refined GM soya bean oil presented higher contents of phytosterols (313 mg/100 g) and tocopherols (931 mg/kg) comparing to other reports.

2011Journal article

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