Percorrer por autor "Ferreira, Diana G."
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- Clitocybe alexandri extract induces apoptosis in a lung cancer cell line: identification of phenolic acids with cytotoxic potentialPublication . Vaz, Josiana A.; Almeida, Gabriela M.; Ferreira, Diana G.; Ferreira, Isabel C.F.R.; Martins, Anabela; Vasconcelos, M. HelenaNatural products which grow in adverse conditions, such as fungi, are a possible rich source of biologically active compounds with potential for drug discovery [1,2]. We have recently reported the growth inhibitory activity of extracts from Clitocybe alexandri, a wild mushroom collected from the northwest of Portugal, in human tumour cell lines (NCI-H460, MCF-7, HCT-15 and AGS) [3]. The ethanolic extract was the most potent one, particularly in NCI-H460 cells (GI50 24.8 ± 2.3 μg/ml) [3]. The aim of this work was to further study the potential of this extract as a possible source of cytotoxic compounds. In order to understand the mechanism of action of this extract in the NCI-H460 cells, the effects on cell cycle (following PI labelling) and apoptosis (following AnnexinV/PI labelling) were evaluated by flow cytometry. Furthermore, the involvement of proteins related to cellular apoptosis was investigated by Western blot. The ethanolic extract was characterized regarding its phenolic composition by HPLC-DAD/ESI. The isolated compounds were also studied regarding their growth inhibitory activity, by SBR assay. The effect of isolated or combined compounds on viable cell number was also evaluated using the Trypan blue exclusion assay. It was observed that the Clitocybe alexandri extract induced an S-phase cell cycle arrest and increased the percentage of apoptotic cells. In addition, treatment with the GI50 concentration for 48h caused an increase in the levels of wt p53, cleaved caspase-3 and cleaved PARP. The main components identified in this extract were protocatechuic acid (16.4 ± 2.2 mg/kg dw), p-hydroxybenzoic acid (8.3 ± 0.4 mg/kg) and cinnamic acid (6.4 ± 0.3 mg/kg). Cinnamic acid was found to be the most potent compound regarding cell growth inhibition. Finally, it was verified that their concomitant use provided the strongest decrease in viable cell number.
- Influência do regime alimentar na sintomatologia da menopausaPublication . Rosa, Ana; Mota, Fabiana; Ferreira, Diana G.; Fevereiro, Telma; Fernandes, António; Gomes, AnaO climatério representa toda a transição da fase reprodutiva à não reprodutiva, coincidindo com a diminuição da produção adequada de estrogénio e progesterona pelos ovários. Ocorre por volta dos 45 anos e pode estender-se até aos 65 anos de idade. A menopausa é o evento que determina o fim do climatério e consiste na extinção permanente da menstruação, resultante da perda da função folicular ovariana ou à remoção cirúrgica dos ovários. Durante ambas as fases, manifestam-se profundas mudanças físicas e emocionais associadas à carência estrogénica. A sintomatologia mais comum consiste em sintomas vasomotores, como modificações do humor, calores, distúrbios do sono e sintomas decorrentes da hipotrofia genital. Em relação aos sintomas emocionais, é possível afirmar que estes são extremamente variáveis, uma vez que muitas mulheres podem ser assintomáticas e outras apresentam sintomatologia mais intensa. Algumas mulheres ainda, vivenciam-no de forma negativa apresentando vários sintomas e queixas psíquicas, entre os quais, a irritabilidade, ansiedade, depressão e as disfunções sexuais. Existem ainda repercussões observadas a longo prazo, tais como osteoporose e aumento de morbilidade cardiovascular. As alterações hormonais associadas à transição menopaúsica podem afectar também a composição corporal, havendo tendência para o aumento de peso. Classicamente a terapia de substituição hormonal (TSH) é a terapia de 1ª linha utilizada no tratamento da sintomatologia da menopausa com diversos efeitos adversos, mas ultimamente têm vindo a surgir alternativas terapêuticas à TSH com substâncias extraídas de plantas que apresentam efeito estrogénico – os fitoesterogénios. Os fitoestrogénios são estrutural e funcionalmente similares ao estradiol. São classificados em quatro grandes grupos: esteróis, terpenoides, saponinas e fenólicos. Dentro do grupo fenólico encontramos as isoflavonas, os lignanos, os coumestanos, os flavanóis, as favonas, as chalconas e os esteróis. As isoflavonas encontram-se entre as classes que possuem maior actividade estrogénica, das quais, a genistaína, a daidzeína e a gliciteína, que estão presentes no gérmen de soja, por exemplo. A soja e seus produtos são alimentos privilegiados nas dietas vegetarianas. Existem três tipos de dieta vegetariana: a pura, restrita ou total (vegan) que se baseia no consumo de produtos estritamente de origem vegetal; a lactovegetariana, que associa também o leite e os seus derivados; e a ovolactovegetariana, que permite também a ingestão de ovos, além de todos os anteriores. Segundo estudos realizados, verifica-se que os vegetarianos consomem cada vez mais soja e alimentos compostos por soja. Ao que parece, estes produtos, pela sua riqueza em proteínas, fibra e fitoesteróides, parecem ser os principais alimentos, responsáveis, mas não os únicos, pelos benefícios apontados às dietas vegetarianas, como as baixas taxas de cancro, doenças cardiovasculares, osteoporose e mortalidade e melhoria da sintomatologia da menopausa. Assim sendo, foi principal objectivo deste estudo relacionar a ingestão de alimentos tipicamente ingeridos por vegetarianas com a sintomatologia da menopausa, quer física, quer emocional.
- A study of the antitumour potential of three Portuguese wild mushroomsPublication . Vaz, Josiana A.; Ferreira, Diana G.; Almeida, Gabriela M.; Cardoso, Adélia; Almeida, Ana P.; Martins, Anabela; Ferreira, Isabel C.F.R.; Vasconcelos, M. HelenaNatural matrixes such as mushrooms represent a rich source of biologically active compounds with recognized potential in drug discovery and development [1,2]. Indeed, many pre-clinical studies have been conducted in human tumour cell lines and in some cases, a number of compounds extracted from mushrooms have entered clinical trials [3]. Our previous results showed that extracts from Agaricus arvensis, Suillus collinitus and Clytocibe alexandri are promising sources of low molecular weight bioactive compounds [4]. The aim of the present work was to study the antitumour potential of the extracts and isolated compounds from three Portuguese wild mushrooms by verifying their effect on various human tumour cell lines in what concerns effect on cell growth, cell cycle profile and programmed cell death. Wild mushrooms were collected from the Northeast of Portugal and classified as Agaricus arvensis, Suillus collinitus and Clitocybe alexandri. Phenolic (methanolic and ethanolic) and polissacharidic extracts were prepared. The effect of the extracts on tumour cell growth inhibition was verified with the SRB assay and the GI50 of each extract was determined for each of the cell lines studied (NCI-H460, MCF-7, AGS and HCT-15). Our preliminary results revealed that all the extracts from Clitocybe alexandri are capable of causing cell growth inhibition and provided GI50 concentrations bellow 60µg/ml in all the cell lines tested [4]. Regarding the effect of the Agaricus arvensis extracts, they all caused an inhibition of cell growth in all cell lines, particularly the methanolic extract which revealed to be a very potent inhibitor of cell growth, especially in the MCF-7 cell line. The evaluation of the effect of the Suillus collinitus extracts will be carried out as well as cell cycle and apoptosis analyses, by flow cytometry. Finally, the isolation and characterization of compounds from these extracts will also be carried out, using HPLC-DAD or HPLC-RI. The structures of the compounds will be established by NMR spectral analysis (1H, 13C, DEPT, COSY, HSQC and HMBC).