Martins, AnabelaFerreira, Isabel C.F.R.Carocho, Márcio2020-04-302020-04-3020112010http://hdl.handle.net/10198/21871A simbiose ectomicorrízica entre fungos e as raízes de algumas espécies de plantas pode ter efeitos importantes a nível da produção de compostos antioxidantes em ambos os simbiontes, como resultado de um processo de reconhecimento mútuo e como resposta à interacção. Neste trabalho, estudaram-se os efeitos do período de co-cultura entre germinantes da espécie florestal Pinus pinaster e as espécies de fungos ectomicorrízicos Pisolithus arhizus e Paxillus involutus nas propriedades antioxidantes e na produção de compostos com igual actividade (fenóis, tocoferóis e açúcares) dos simbiontes. Assim, avaliaram-se os primeiros estádios do processo de micorrização (6, 24 e 72h), testando-se todos os elementos (raízes, micélio e meio de cultura) de modo a compreender a resposta de cada um dos parceiros à simbiose. As propriedades antioxidantes foram determinadas através da realização de ensaios de avaliação da actividade captadora de radicais livres 2,2-difenil-1-picril-hidrazilo (DPPH), poder redutor, inibição da descoloração do β-caroteno e inibição da peroxidação lipídica pela diminuição da formação de espécies reactivas do ácido tiobarbitúrico (TBARS). As concentrações em fenóis, tocoferóis e açúcares foram obtidas pelo ensaio colorimétrico Folin Ciocalteus, por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) acoplada a um detector de fluorescência e por HPLC acoplada a um detector de índice de refracção (RI), respectivamente. Os efeitos observados foram interpretados do ponto de vista ecológico (compreensão dos efeitos da associação micorrízica na produção de antioxidantes, nomeadamente a percepção se este mutualismo potencia a actividade antioxidante ou se, por outro lado, a inibe), mas também do ponto de vista medicinal (utilização das associações simbióticas para obtenção de antioxidantes). O fungo Pisolithus arhizus provou ser mais compatível com Pinus pinaster do que o Paxillus involutus, dado que a actividade antioxidante deste aumentou entre as 48 e as 72h, enquanto no Pisolithus arhizus essa actividade decresceu no mesmo período de tempo (podendo evidenciar menos stresse oxidativo). Apesar da espécie Paxillus involutus parecer ser menos indicada para programas de reflorestação que envolvam processos de micorrização, esta poderá ser uma fonte de compostos bioactivos pois revelou uma maior produção de compostos antioxidantes nos primeiros estádios da simbiose. De facto, a concentração máxima de fenóis foi obtida após as 6h. Desta forma, caso a finalidade seja a produção de compostos bioactivos, a co-cultura deverá ser interrompida neste período.Ectomycorrhizal symbiosis between fungi mycelia and the roots of some plants could have important effects in the levels of antioxidants of both parts. In the present work, the effects of co-culture period (6, 24 and 72h) in the antioxidant properties and antioxidants (phenolics, tocopherols and sugars) production during early steps of in vitro mycorrhization (Pisolithus arhizus-Pinus pinaster and Paxillus involutus-Pinus pinaster) were evaluated. The studied parameters were determined in each culture element (root, mycelium and medium) in order to understand the response of each partner to the symbiotic association. The antioxidant properties were determined by assays evaluating the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radicals scavenging activity, reducing power, β-carotene bleaching inhibition and lipid peroxidation inhibition by the decrease in tiobarbituric acid reactive substances (TBARS). The concentrations in phenolics, tocopherols and sugars were obtained by Folin Ciocalteus colorimetric assay, high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to a fluorescence detector and HPLC coupled to a refraction index detector (RI), respectively. The observed effects were analyzed in the ecological (comprehension of the mycorrhizal association effects in the antioxidants production, understanding if the mutualism stimulates or inhibits the antioxidant activity) and medicinal (use of symbiotic associations to obtain antioxidants) perspectives. Pisolithus arhizus proved to be more compatible with Pinus pinaster than Paxillus involutus, since the antioxidant activity in the latter species increased from 48 to 72h, while Pisolithus arhizus antioxidant properties decreased at the same period (indicative of less oxidative stress). Although Paxillus involutus proved to be less suitable to be included in forestation programs using mycorrhization processes, it revealed a higher potential for bioactive compounds production in the early steps of symbiosis. A maximal value of phenolics content was obtained after the first 6h, and, therefore, considering bioactive compounds production purposes, the co-culture should be stopped at that time.porSimbiose ectomicorrízicaPinus Pinastermaster thesis202476952